Efecto del almacenamiento de menisco a 4ºC sobre la morfología y la capacidad de respuesta celular a los factores TGF-ß1, IGF-1, aFGF, bFGF y BMP-7 en cultivo en monocapa

• Autores: Íñigo Izal, Raúl Esparza, Purificación Ripalda Cemboráin, Francisco Forriol Campos
• Localización: Trauma, ISSN 1888-6116, Vol. 20, Nº 1, 2009, págs. 63-67
• Idioma: español
• Títulos paralelos:
  • Effect of meniscus storage at 4ºC upon cell morphology and capacity to respond to growth factors TGF-ß1, IGF-1, aFGF, bFGF and BMP-7 in monolayer culture
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    Objetivo del trabajo: Estudiar la viabilidad del almacenamiento de menisco a 4ºC.

    Material y método: Se obtuvieron fragmentos de menisco procedentes de corderos sanos en condiciones de esterilidad. Como control, se utilizaron fragmentos de tejido digeridos inmediatamente después de la extracción del menisco, el resto se almacenaron a 4ºC sumergidos en medio de cultivo durante 15 y 30 días. Tras el almacenamiento, se realizó la digestión del material utilizando tripsina, colagenasa y dispasa y se cultivaron las células en monocapa. Se estudió la morfología celular al microscopio óptico y la respuesta a los factores de crecimiento TGF-ß1, IGF-1, aFGF, bFGF y BMP-7 mediante ensayos de proliferación.

    Resultados: La respuesta celular a bFGF e IGF-1 se incrementó tras los 15 días de tratamiento, para volver a descender tras los 30 días. La capacidad de respuesta tras el tratamiento con BMP-7 descendió a los 15 días y volvió a ser similar al control a los 30 días. Los factores aFGF y TGF-ß no modificaron la respuesta que se produjo en las células.

    Conclusiones: Tras el almacenamiento a 4ºC las células sufren cambios morfológicos y bioquímicos que las lleva a modificar su sensibilidad a algunos factores de crecimiento

  • English

    Aim: To evaluate the viability of meniscus storage at 4ºC.

    Material and method: Meniscus fragments were obtained from healthy goats under sterile conditions. As control, use was made of tissue fragments digested immediately after meniscus harvesting; the rest were stored immersed at 4ºC in culture medium for 15 and 30 days. Following storage, the material was digested using trypsin, collagenase and dispase, with monolayer culture of the cells. Cell morphology was evaluated under the light microscope, and cell response to growth factors TGF-ß1, IGF-1, aFGF, bFGF and BMP-7 was assessed by proliferation tests.

    Results: The cell response to bFGF and IGF-1 increased after 15 days of treatment, followed by a decrease after 30 days.The response capacity after BMP-7 treatment decreased after 15 days and returned to control levels after 30 days. Factors aFGF and TGF-ß did not modify cell response.

    Conclusions: Following storage at 4ºC, the cells undergo morphological and biochemical changes that modify their sensitivity to certain growth factors