Nuevo método para la selección rápida de plantas de banano (Musa spp. AAA cv. Grande naine) transformadas con gen bar procedentes de campo, empleando glufosinato de amonio

• Autores: Rafael Gómez Kosky, Maritza Reyes Vega, Idalmis Bermúdez Caraballoso, Borys Chong Pérez, Yelenys Alvarado-Capó
• Localización: Revista Colombiana de Biotecnología, ISSN 0123-3475, ISSN-e 1909-8758, Vol. 12, Nº. 2, 2010, págs. 248-258
• Idioma: español
• Títulos paralelos:
  • A new method for the rapid selection of banana plants (Musa spp. AAA cv. Grande naine) having bar gene in the field using ammonium gluphosinate
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• Resumen
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    Los genes marcadores de la selección son ampliamente utilizados para la transformación eficiente de diferentes cultivos, sin embargo, existen muy pocas referencias sobre el desarrollo de métodos de selección temprana en campo de plantas supuestamente transformadas con marcador de selección tipo herbicidas. La presente investigación tuvo como objetivo evaluar el efecto del glufosinato de amonio a partir del herbicida Finale® en los fragmentos de hojas de plantas de campo cultivados in vitro, para la selección de líneas transformadas de banano cv. Grande naine (Musa spp. AAA), con una construcción que porta como marcador de selección el gen bar. A partir del método desarrollado con el empleo de fragmentos de hojas de plantas procedentes de campo, cultivados in vitro en el medio de cultivo agar al 1% más agua y 30,0 g/l-1 de glufosinato de amonio se logró diferenciar las dos líneas transformadas del control no transformado, a partir de la expresión del gen bar. Ambas líneas fueron positivas en el análisis molecular de PCR. Estos resultados permiten disponer de una herramienta útil y simple como parte de un protocolo de transformación genética para el cultivo del banano, siendo el primer informe de este resultado a nivel internacional.

  • English

    Selectable marker genes have been widely used for the efficient transformation of different crops; however, the pertinent literature contains very few references about the development of early selection methods in the field for plants supposedly transformed by herbicidal selectable marker. This research was aimed at evaluating the effect of ammonium gluphosinate in Finale herbicide on leaf fragments from in vitro plants grown in the field for selecting putative transformed banana (Musa spp. AAA group) cv. Grande Nain lines with a construction having the bar gene as selectable marker gene. Bar gene expression led to differentiating both transformed lines from the untransformed control using the method developed with leaf fragments from in vitro field plant cultures in 1% agar plus water and 30.0 gl-1 ammonium gluphosinate. Both lines were positive in PCR molecular analysis. These results provide a useful, simple tool as part of a genetic transformation protocol for banana, this being the first international report of such result.