Aislamiento de cepas de traustoquitridios en la zona costera de Puerto Montt, Chile y evaluación de la producción de ácido docosahexaenoico (C22:6n-3, DHA)

• Autores: I. Hinzpeter, B. Quilodrán, R. Stead, L. Trujillo, J. Vidal, C. Shene
• Localización: Afinidad: Revista de química teórica y aplicada, ISSN 0001-9704, Vol. 66, Nº. 544, 2009, págs. 482-487
• Idioma: español
• Títulos paralelos:
  • Aïllament de soques de traustoquitridis en la zona costanera de Puerto Montt, Xile, i avaluació de la producció d’àcid docosahexaenoic (C22:6n-3, DHA)
  • Isolation of thraustochytrid strains in the coastal zone of Puerto Montt, Chile and evaluation of Docosahexaenoic acid (22:6n-3, DHA) production
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• Resumen
  • español

    Cuarenta y seis cepas que presentaron las características morfológicas descritas para traustoquitridios fueron aisladas desde muestras colectadas en cinco localidades de la zona costera de Puerto Montt, Chile, utilizando la técnica de polen de pino. Las 16 cepas que mostraron el perfil característico de tres bandas cuando el ADN fue amplificado con un conjunto de tres cebadores (FA 1 RA 1, FA2RA2 Y FA3RA3) diseñados para estos microorganismos, fueron cultivadas en medio líquido para evaluar la producción de ácido docosahexaenoico (C22:6n-3, DHA). El cultivo se realizó en matraces de Erlenmeyer agitados y la composición del medio basal fue: glucosa 10 gil, extracto de levadura 4 gil, en agua de mar diluida al 70%. Sólo 6 cepas produjeron lípidos en los que se detectó DHA; los mayores contenidos de DHA en los ácidos grasos totales y de DHA en la biomasa fueron 46,4% (cepa G4) y 36,2 mg/g (cepa M12-X1), respectivamente. El análisis de filogenia molecular basado en el alineamiento de la secuencia del gen que codifica para el ARN de la subunidad pequeña ribosomal (18S rRNA) confirmó que las tres cepas nativas que producen DHA pertenecen al phylum Labyrinthulomycota. Pruebas preliminares demostraron que es posible incrementar la concentración de biomasa (83%), el contenido de DHA en la biomasa (153%) y la concentración de DHA (71 %) a través de la inclusión de glutamato monosódico en el medio de cultivo basal.

  • English

    Forty six strains that displayed thraustochytrid’s morpho-logical characters were isolated from five different sites at coastal zone, Puerto Montt, Chile. Molecular analysis using a set of primers designed based on 18S rDNA sequence alignment of known Thraustochytrium strains(17) was used for screening sixteen strains that were cultivated (glucose 10 g/L, yeast extract 4 g/L, in artificial sea water diluted to 70%) in rotary-shaken Erlenmeyer flasks. Doco-sahexaenoic acid (22:6n-3, DHA) was detected in the lipids from biomass of six strains. Different strains presented the highest DHA content in the total fatty acids (46.4%, G4 strain) and the highest DHA content in the dry biomass (36.2 mg/g, M12-X strain). The 18S rDNA sequence align-ment confirmed that three of the DHA producer strains belong to the phylum Labyrinthulomycota. Preliminary tests carried out with one of the isolated strains showed that through addition of monosodium glutamate to basal growth medium biomass concentration, DHA content in the biomass and DHA concentration can be increased by 83%, 153% and 71%, respectively.

  • català

    S’aïllen quaranta-sis soques que presenten les característiques morfològiques descrites per als traustoquitridis partir de mostres recol·lectades en cinc localitats de la zona costanera de Puerto Montt, Xile, utilitzant la tècnica de pol·len de pi. Les 16 soques que mostren el perfil característic de tres bandes en amplificar el ADN amb un conjunt de tres encebadors (FA1RA1, FA2RA2 i FA3RA3) dissenyats per a aquests microorganismes(17), es cultiven en medi líquid per avaluar la producció d’àcid docosahe-xaenoic (C22:6n-3, DHA). El cultiu es realitza en matrassos d’Erlenmeyer agitats, essent la composició del medi basal: glucosa 10 g/L, extracte de llevat 4 g/L, en aigua de mar diluïda al 70%. Només 6 soques produeixen lípids en els que es detecta DHA; els majors continguts de DHA en els àcids grassos totals i de DHA en la biomassa són 46,4% (soca G4) i 36,2 mg/g (soca M12-X1), respectivament. La anàlisi de filogènia molecular basat en el alineament de la seqüència del gen que codifica per al ARN de la sub-unitat menor ribosòmic (18S rRNA) confirma que les tres soques natives que produeixen DHA pertanyen al phylumLabyrinthulomycota. Les proves preliminars realitzades demostren que és possible incrementar la concentració de biomassa (83%), el contingut de DHA en la biomassa (153%) i la concentració de DHA (71%) mitjançant la inclu-sió de glutamat monosòdic en el medi de cultiu basal.