Identificación electroforética de 2-macroglobulina en plasma de ovino de pelo (Ovis aries) y búfalo (Bubalus bubalis)

• Autores: Daniel Iván Barrera, Jorge H. Giraldo, Carlos M. Duque, Luis F. Arbeláez Ramírez
• Localización: Revista Colombiana de Ciencias Pecuarias, ISSN-e 0120-0690, Vol. 20, Nº. 3, 2007, págs. 304-311
• Idioma: español
• Títulos paralelos:
  • Electrophoretic identification of á2-macroglobulin in the plasma of tropical hair sheep (Ovis aries) and buffalo (Bubalus bubalis)
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• Resumen
  • español

    A traves del presente estudio se analizaron plasmas sanguineos de seis especies, incluyendo el humano tanto en estado gestante como no gestante, identificandose por primera vez en plasma, la glicoproteina �¿2-Macroglobulina (�¿2-M) de ovino de pelo (Ovis aries) y de bufalo (Bubalus bubalis). La presencia de esta proteina en el plasma sanguineo de todas las especies en estudio se demostro mediante electroforesis en gel de poliacrilamida usando sodio dodecilsulfato como agente denaturante (SDS PAGE) al 7.5% identificandose como bandas de 180 kDa y en forma no denaturante PAGE 5% como bandas de 720 kDa. Estas ultimas bandas fueron claramente intercambiables de la forma tetramerica a la forma monomerica en los ensayos electroforeticos. Como controles se usaron la �¿2-M (tetramerica) y la proteina de la zona de gestacion (PZP) (dimerica) purificadas a un 98%; asi como, las bandas de estas dos proteinas en el plasma humano. El analisis de la secuencia del dominio N-terminal de la (�¿2-M) de ovino de pelo, fue muy similar al de la proteina humana purificada. Tanto la �¿2-M humana como la bovina llegaron a ser activadas a la forma rapida por medio de la reaccion con metilamina. Lo anterior demuestra diferencias en la reactividad de las �¿2-M animales con la amina primaria cuando se comparan los resultados con la forma rapida de la �¿2-M humana. Sera necesario unificar los metodos de purificacion de esta proteina en todas las especies, de tal manera que los dominios sensibles de las �¿-macroglobulinas (tioester y region senuelo) tengan el mismo tratamiento y el mismo grado de desnaturalizacion para todas las preparaciones de �¿2-M.

  • English

    Blood plasma from six different non pregnant and pregnant species, including human blood plasma, was analyzed for detection of á2-Macroglobulin (á2-M). The tropical hair sheep (Ovis aries) and the buffalo (Bubalus bubalis) were studied for the first time in Colombia. The presence of the á2-M in plasma of all the species was demonstrated by SDS 7.5% PAGE as bands of 180 kDa as well as by non-denaturing 5% PAGE with bands of 720 kDa. The tetrameric form �¿2-M (tetramerica) and the pregnancy zone protein (PZP) (dimeric) purified at 98%, as well as its corresponding bans from human plasma were used as control. The N-terminal sequence of the band of 180 kDa in Tropical hair sheep plasma was very similar to the purified human �¿2-M. The results indicated the presence of �¿2-M in blood plasma of all the species tested, while the PZP was present only in the pregnant human plasma. Both human and bovine �¿2-M became activated with the fast form by reacting with Methylamine. This Fac. demonstrates the differences in the reactivity of the animal�fs �¿2-M with primary amine as compared with the human �¿2-M. It could be necessary to unify purification methods into one method for all species, so that the sensitive domain of the �¿-macroglobulins (thiolester and bait region) receives the same treatment and grade of denaturation for all �¿2-M preparation.