Resumen de Implementación de la técnica inmunoensayoenzimática ELISA como método de diagnóstico para la detección de Syphacia obvelata en ratones producidos para uso experimental
Mileyna Gudiño, Rosa de Jesús, Andrés Osorio, Haydee Urdaneta, Nacarid Alfonzo, Yaneth Mora, James O'Callaghan
El propósito de esta publicación es reportar el diagnóstico de la Syphacia obvelata con la técnica de ELISA en ratones experimentales. La S. obvelata fue obtenida de un pool de muestras de ratones previamente infectados con los huevos de los para´sitos vi´a oral, e´stos fueron monitoreados para observar los huevos mediante pruebas de Graham y para observar los para´sitos adultos en el colon y el ciego. El anti´geno crudo fue preparado desde el para´sito completo. Los para´sitos (600 gusanos), fueron lavados y rotos por sonificacio´n y las protei´nas en una concentracio´n de 1 pgi´ml fueron obtenidas por centrifugacio´n. El suero positivo fue obtenido de animales producidos fuera del a´rea de produccio´n con unas mi´nimas condiciones de mantenimiento: el agua y alimento sin esterilizar fueron colocados ad limitum y la cama (ca´scara de arroz) era cambiada semanalmente. Las cri´as fueron destetadas al mes de nacidos y mantenidos en cajas T3 (40 x 24 x 15) cm3. El suero negativo fue obtenido de ratones machos C57BL/6 de dos meses de edad, mantenidos en aisladores con presio´n positiva y todos los insumos esterilizados, la infeccio´n fue chequeada por la prueba de Graham y necropsia. Para la estandarizacio´n de la te´cnica ELISA se uso la densidad o´ptica de 0,0035 como un valor del punto de corte el cual fue considerado para el suero positivo y el valor de densidad o´ptica de 0,0024 h e considerado para el suero negativo como el otro punto de corte. La evaluacio´n hecha presento´ que 61 de 72 sueros de los ratones monitoreados fueron positivos a la te´cnica de ELISA. Adema´s, la prueba de ELISA presento´ 95,3% de sensibilidad y 100% de especificidad. Los resultados obtenidos son similares a los encontrados por otros investigadores utilizando para´sitos similares, la te´cnica de ELISA es una herramienta u´til para el diagno´stico de S. obvelata debido a que el animal no es sacrificado para realizar el diagno´stico de estos para´sitos y es menos costoso en relacio´n a horaltrabajo/hombre cuando hablamos de colonias de numerosos animales.
