Método de análisis por cromatografía gaseosa de β(1-)glucano aislado de Saccharomyces cerevisiae

• Autores: Tania Véliz, Mario Noa Pérez, Elizabeth Noa
• Localización: Afinidad: Revista de química teórica y aplicada, ISSN 0001-9704, Vol. 59, Nº 501, 2002, págs. 553-557
• Idioma: español
• Títulos paralelos:
  • Method of analysis by gaseous chromatography of β(1-)glucano isolated from Saccharomyces cerevisiae
  • Mètode d'anàlisi per cromatografia gasosa de β(1-)glucano aïllat de Saccharomyces cerevisiae
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• Resumen
  • español

    El β(1-3)glucano, aislado de la pared celular de Saccharomyces cerevisiae es un potente estimulador del sistema inmunológico y de la resistencia contra enfermedades bacterianas, virales, fúngicas y proto-zoarias, por lo que se le considera modificador de la respuesta biológica (MRB). Este homopolisacárido, una vez purificado, posee una estructura molecular lineal rígida. Ello le confiere una elevada insolubilidad, que dificulta su análisis, lo que hace necesario su hidrólisis en los monosacáridos componentes (glucosa) para el análisis de su pureza. Por ello se propone una metodología para la cuantificación de glucosa en el B(1-3) glucano aislado de Saccharomyces cerevisiae utilizando cromatografía gas- líquido (CGL), que combinó procedimientos de hidrólisis, neutralización, derivatiza-ción y análisis cromatográfico del contenido de gluco-sa, con 2 estándares internos (xilosa e inositol). Se determinó, para un n =10 réplicas, el rendimiento de glucosa, la variabilidad, el tiempo de análisis, y el costo utilizando para los análisis un cromatógrafo de gases con columna empacada de SP-2340 al 3% y detector FID. Los resultados en cuanto a rendimiento de glucosa y variabilidad (83,61 % = 3,47), tiempo de análisis (30 h) y costo en materiales ($ 0.41), así como los de la validación de esta metodología, permitieron recomendarla como prueba de control de calidad del producto farmacéutico terminado en cada lote de ß(1-3)glucano.

  • català

    El β(1-3)glucano, aïllat de la paret cel·lular de Saccharomyces cerevisiae és un potent estimulador del sistema immunològic i de la resistència contra malalties bacterianes, virals, fúngiques i proto-zoarias, per la qual cosa se'l considera modificador de la resposta biològica (MRB). Aquest homopolisacárido, una vegada purificat, posseeix una estructura molecular lineal rígida. Això li confereix una elevada insolubilitat, que dificulta la seva anàlisi, la qual cosa fa necessari la seva hidròlisi en els monosacàrids components (glucosa) per a l'anàlisi de la seva puresa. Per això es proposa una metodologia per a la quantificació de glucosa en el B(1-3) glucano aïllat de Saccharomyces cerevisiae utilitzant cromatografia gas- líquid (CGL), que va combinar procediments d'hidròlisis, neutralització, derivatiza-ción i anàlisi cromatogràfica del contingut de gluco-sa, amb 2 estàndards interns (xilosa i inositol). Es va determinar, per a un n =10 rèpliques, el rendiment de glucosa, la variabilitat, el temps d'anàlisi, i el cost utilitzant per a les anàlisis un cromatògraf de gasos amb columna empacada de SP-2340 al 3% i detector FID. Els resultats quant a rendiment de glucosa i variabilitat (83,61% = 3,47), temps d'anàlisi (30 h) i cost en materials ($ 0.41), així com els de la validació d'aquesta metodologia, van permetre recomanar-la com a prova de control de qualitat del producte farmacèutic acabat en cada lot de ß(1-3)glucano.

  • English

    β(1-3)glucano, isolated from the cell wall of Saccharomyces cerevisiae is a powerful stimulator of the immune system and resistance against bacterial, viral, fungal and proto-zoar diseases, so it is considered a modifier of the biological response (MRB). This homopolysaccharide, once purified, has a rigid linear molecular structure. This gives it a high insolubility, which hinders its analysis, which makes necessary its hydrolysis in the monosaccharides components (glucose) for the analysis of its purity. For this reason, a methodology is proposed for the quantification of glucose in the B(1-3)glucano isolated from Saccharomyces cerevisiae using gas-liquid chromatography (CGL), which combined hydrolysis, neutralization, derivatization-cation and chromatographic analysis of gluco-sa content, with 2 internal standards (xilose and inositol). For an n ' 10 replicas, glucose performance, variability, analysis time, and cost were determined using a gas chromatograph with SP-2340's 3 % packed column and FID detector for analysis. The results in terms of glucose performance and variability (83.61% ' 3.47), analysis time (30 h) and cost in materials ($ 0.41), as well as those of the validation of this methodology, allowed it to be recommended as a quality control test of the finished pharmaceutical product in each batch of '(1-3)glucano.