Resumen de Caracterización del receptor de estrógenos tipo alfa (REa) asociado a la membrana plasmática de neuronas septales hipocampales

C.M. Ramírez, Jorge Nicolás Marrero Alonso, M. González, María del Carmen González Montelongo, M. L. Barreiro, Mario Lorenzo Díaz González, Raquel Marín Cruzado

• español

  Numerosas evidencias de estudios tanto in vivo como in vitro demuestran el papel de los estrogenos en el desarrollo y la preservacion del sistema nervioso central. A pesar de que los mecanismos de accion estrogenicos clasicos o genomicos son bien conocidos, cada vez se describen mas acciones estrogenicas altemativas particulamiente relevantes en el feno- meno de la neuroproteccion. En estos procesos parecen estar implicados receptores de estro- geno de membrana, cuya identidad molecular permanece aun por dilucidar. Con el fm de investigar la estructura molecular de estos receptores de membrana. hemos analizado por western-blot una bateria de anticuerpos dirigidos contra diferentes regiones del receptor nuclear tipo alfa, en fracciones de membrana plasmatica de dos lineas neuronales de septum (SN56) e hipocampo de raton (HT22). Ademas, dado que la glicosilacion podria ser una modificacion post-traduccional en los receptores de estrogenos (RE), hemos explorado esta posibilidad como posible factor determinante de la existencia de diferentes formas moleculares del receptor de estrogenos en la membrana plasmatica. Nuestros resultados demuestran, en ambas lineas celulares, la existencia de una alta homologia estructural entre las for- mas nucleares y de membrana de los RE tipo alfa (REa), asi como la existencia de patrones de O-glicosilacion en la isoforma membranaria de 80 KDa.

• English

  Evidences from in vivo and in vitro studies have demonstrated the role of estrogens in the development and preservation of the central nervous system. In addition to the well- known classical or genomic mechanisms of actions of estrogens, evidences accumulated in recent years have substantiated the existence of alternati\e mechanisms of actions for these hormones, which appear to be particularly relevant in the phenomenon of neuroprotection.

  Interestingly, these alternative actions are mediated by membrane estrogen receptors whose molecular identities are not well understood. In order to investigate the molecular features of these membrane located estrogen receptors, we have used several antibodies directed to different regions of the nuclear estrogen receptor (ER) to analyse by western blot the purified plasma membrane proteins of septum-derived SN56 and hippocampal-derived HT22 cell lines. Furthermore, taking into account that glycosylation may be a post-traductional modification accounting for the observed different estrogen receptors molecular weights, we have explored here the putative glycosylation of membrane ER isoforms. Our results demonstrate, in both cell lines, the existence of a high degree of structural homology bet- ween nuclear and membrane ER counterparts, as well as a clear O-glycosylation pattern in the 80 kDa membrane isoform.