Resumen de Multidrug resistance increment in a human colon carcinoma cell line by colchicine.

Miguel José Ruiz Gómez, Luisa Gil Carmona, Antonio Souvirón Rodríguez, Manuel Martínez Morillo

• español

  El mecanismo más importante en la resistencia a fármacos es el fenómeno de multirresistencia (MDR). Es posible seleccionar células MDR por exposición in vitro a agentes citotóxicos. La resistencia se debe a la sobreexpresión de la glicoproteína-P (P-Gp), la cual disminuye la acumulación intracelular de fármacos. El objetivo de este estudio consiste en el desarrollo de un modelo de selección de resistencia a fármacos, por exposición de una línea celular de adenocarcinoma de colon humano a colchicina durante un corto período de tiempo. Las células seleccionadas (HCA-2/1cch) muestran resistencia cruzada con otras sustancias no presentes en el medio durante la selección. El incremento relativo es de 3,32 para colchicina, 3,15 para vinblastina, 2,62 para vincristina y 5,22 para mitomicina C. Los niveles de P-Gp se determinan por citometría de flujo. Se observa un incremento de 2,35 y 1,59 en los canales pico y medio de fluorescencia, respectivamente, indicando un incremento de la expresión de P-Gp en relación con la línea parental. Además, el verapamil (10 µg/ml) produce una reversión parcial de la resistencia a múltiples sustancias. Las tasas de sensibilización son de 7,41 para colchicina, 1,25 para vinblastina, 2,36 para vincristina y 1,17 para mitomicina C. Los datos obtenidos sugieren que el período de exposición (10 semanas) y la dosis de colchicina empleada (0,5 µg/ml) son suficientes para producir un incremento en la multirresistencia a fármacos, lo que podría ser debido a una mayor expresión de P-Gp.

• English

  The most important mechanism in drug resistance is the multidrug resistance (MDR) phenomenon. It is possible to select MDR cells by in vitro exposure to cytotoxic agents. The resistance is due to the hyperexpression of the P-glycoprotein (P-Gp) that take drugs out from the cells. In this study, a colchicine resistant subline (HCA-2/1cch) was selected from a human colon adenocarcinoma after a short period of drug exposure, as an in vitro model of drug resistance selection. These cells showed cross-resistance to other drugs, which were not present in the medium during selection. The relative resistance was 3.32 for colchicine, 3.15 for vinblastine, 2.62 for vincristine and 5.22 for mitomycin C. P-glycoprotein levels were assayed by flow cytometry. It was found that a significant increase of 2.35 and 1.59 had occurred in the peak and mean channel of fluorescence, respectively; indicating an increment of P-glycoprotein expression in relation to the parental line. Moreover, verapamil (10 µg/ml) produced a partial reversion of multidrug resistance. The sensitisation rates were 7.41 for colchicine, 1.25 for vinblastine, 2.36 for vincristine and 1.17 for mitomycin C. The data obtained suggest that colchicine exposure period (10 weeks) and dose (0.5 µg/ml) assayed were sufficient to produce an increment in multidrug resistance. This resistance could be due to higher level of P-Gp expression.