Resumen de Cytoskeleton involvement on intestinal absorption processes.

Ana Díez Sampedro, María Pilar Lostao Crespo, Ana María Barber Cárcamo

• español

  Resultados anteriores del laboratorio han demostrado que la citocalasina E, un inhibidor del citoesqueleto, ejerce un efecto inhibitorio indirecto sobre la actividad del cotransportador intestinal de azúcares SGLT1. En el presente trabajo, se observa que en condiciones anaeróbicas, con déficit de energía metabólica, la citocalasina E no modifica el transporte de galactosa, lo que confirma que la inhibición sobre el SGLT1 se relaciona con alteraciones del citoesqueleto. También el transporte intestinal de fenilalanina dependiente de Na+ se inhibe por la presencia de citocolasina E en el medio de incubación. En cambio, no se modifican las actividades de las enzimas de la membrana apical sacarasa, aminopeptidasa N y g-glutamil transferasa, proteínas que sólo poseen un dominio transmembrana y cuyos centros activos se proyectan en la luz intestinal. Las ligeras modificaciones ultraestructurales observables en las células epiteliales del intestino tras 30 minutos de incubación en presencia de citocalasina E no explican sus efectos inhibidores sobre el transporte dependiente de Na+ de galactosa y fenilalanina. En suma, los presentes resultados indican que la inhibición de la citocalasina E sobre el transporte intestinal de galactosa y fenilalanina es secundaria a su acción sobre el citoesqueleto, vía alteración estructural de las proteínas transportadoras.

• English

  It has been recently demonstrated in the laboratory that the cytoskeletal inhibitor cytochalasin E has an indirect inhibitory effect on the function of the intestinal Na+-sugar cotransporter (SGLT1). The present work confirms that cytochalasin E inhibits SGLT1 activity through cytoskeleton disruption, showing that in anaerobic conditions (N2 bubbling), which implies low cytosolic ATP levels, the inhibition is not observed. As it occurs in sugar transport, the Na+-dependent intestinal transport of phenylalanine decreases if cytochalasin E is present in the incubation medium. However, the activity of the brush border enzymes sucrase, amino peptidase N and g-glutamyl transferase is not affected by the inhibitor. These enzymes only have one transmembrane domain and the active center is projected to the intestinal lumen. Therefore, cytoskeleton changes that could modify the transmembrane enzyme segment do not alter the activity of these enzymes. Examination of the intestine morphology after 30 min incubation with cytochalasin E showed only light modifications which do not seem to explain the inhibitory effects of the toxin on Na+-sugar or Na+-phenylalanine cotransporters function.

  On the whole, these results indicate that the inhibition of cytochalasin E on galactose and phenylalanine intestinal transport is secondary to its action on cytoskeleton through protein structure modifications.