Caracterización enzimática de la &1,3-galactosiltransferasa bovina. validación de un ensayo radiométrico y mecanismo cinético

• Autores: Ana Monegal, Vicent Bulone, Antoni Planas
• Localización: Afinidad: Revista de química teórica y aplicada, ISSN 0001-9704, Vol. 62, Nº. 519, 2005, págs. 505-512
• Idioma: español
• Texto completo no disponible (Saber más ...)
• Resumen

  • La &3-galactosiltransferasa (&3GT) cataliza la transferencia de galactosa del UDP-Gal (azúcar nucleótido dador) a un grupo N-acetillactosaminil o lactosil terminal en glicoproteínas y glicolípidos con formación de un enlace &-1,3 glicosídico. El sacárido terminal formado, Gal&3NAcGal&4Glu-R, es el principal determinante antigénico responsable del rechazo hiperagudo en xenotransplantes. Se implementa y valida un ensayo radiométrico para la determinación de la actividad enzimática de la &3GT, y se caracteriza el enzima recombinante (dominio catalítico) expresado en Eschericia coli. El enzima sigue un mecanismo cinético bi bi secuencial ordenado con unión del sustrato dador (UDP-Gal) seguido del sustrato aceptor para formar el complejo ternario productivo, con valores de K? de 30??M para el sustrato dador y 1.2 mM para el aceptor lactosa.