Validación del Lowry modificado para cuantificar el contenido de proteínas de una vacuna antialérgica

• Martínez Mieres, Yarelis ^[1] ; Mateo Morejón, Maytee ^[1] ; Ramírez González, Wendy ^[1] ; García Freijó, Anette ^[1] ; Revilla Fernández, Yenisleidy ^[1] ; Labrada Rosado, Alexis ^[1]
  1. [1] Centro Nacional de Biopreparados
• Localización: Revista cubana de farmacia, ISSN-e 1561-2988, ISSN 0034-7515, Vol. 56, Nº. 1 (enero - marzo), 2023
• Idioma: español
• Títulos paralelos:
  • Validation of the modified Lowry to quantify the protein content of an allergy vaccine
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• Resumen
  • español

    Introducción: Prolinem BT es un candidato vacunal de segunda generación que emplea como ingrediente activo alérgenos purificados a partir del extracto del ácaro Blomia tropicalis, los cuales constituyen los alérgenos mayores de esa especie.Objetivo: Validación del Lowry modificado a microplacas como técnica para cuantificar el contenido de proteínas totales del ingrediente activo de la vacuna PROLINEM-BT.Métodos: Para la cuantificación de esas proteínas purificadas se desarrolló y validó la técnica de Lowry modificado a microplacas. Los parámetros estudiados en la validación fueron especificidad, linealidad y paralelismo, precisión y exactitud.Resultados: El método fue específico en la cuantificación de proteínas totales. El rango de la curva de 20 a 100 µg/mL tuvo un comportamiento lineal (r = 0,99). La técnica es precisa basado en los coeficientes de variación obtenidos (todos inferiores al 5 %) y exacta dado que todos los valores presentaron el 100 % de recobrado.Conclusiones: Se demostró que el método de Lowry modificado a microplacas es válido para la cuantificación de proteínas totales del ingrediente activo de Prolinem BT.

  • English

    Introduction: Prolinem BT is a second-generation vaccine candidate that uses as active ingredient allergens purified from Blomia tropicalis mite extract, which constitute the major allergens of that species.Objective: Validation of the microplate modified Lowry as a technique to quantify the total protein content of the active ingredient of the PROLINEM-BT vaccine.Methods: For the quantification of these purified proteins, the microplate modified Lowry technique was developed and validated. The parameters studied in the validation were specificity, linearity and parallelism, precision and accuracy.Results: The method was specific in the quantification of total proteins. The curve ranges from 20 to 100 µg/mL and had a linear behavior (r = 0.99). The technique is precise based on the coefficients of variation obtained (all less than 5 %) and accurate since all values presented 100 % recovery.Conclusions: It was demonstrated that the Lowry method modified to microplates is valid for the quantification of total proteins of the active ingredient of Prolinem BT.