Estrategias para identificar derivados de anfetamina y metanfetamina en orina por cromatografía de gases-espectrometría de masas

• McPherson Medina, Ariadna ^[1] ; Martinez_Brito, Dayamin ^[1] ; Torres Castellanos, Mirta ^[1] ; Fiallo Fernández, Taimí ^[1] ; Correa Vidal, Teresa ^[1] ; Montes de Oca Porto, Rodny ^[1]
  1. [1] Laboratorio Antidoping de la Habana
• Localización: Revista cubana de farmacia, ISSN-e 1561-2988, ISSN 0034-7515, Vol. 55, Nº. 3 (Julio-Septiembre), 2022
• Idioma: español
• Títulos paralelos:
  • Strategies for Identifying Amphetamine and Methamphetamine Derivatives in Urine by Gas Chromatography-Mass Spectrometry
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    Introducción: Uno de los desafíos en el análisis de control de dopaje es demostrar la precisión y exactitud de los resultados analíticos. Por ello, es necesario mostrar evidencias durante el análisis de las muestras sobre qué exactamente consumió el atleta. La selegilina es una sustancia estimulante sintetizada a partir de la levo-metanfetamina. Sus metabolitos fundamentales son la L-anfetamina y la L-metanfetamina las cuales son, además, metabolitos de otras sustancias.Objetivo: Evaluar la formación de derivados en el análisis de anfetamina y metanfetamina, a través de tres parámetros cromatográficos, para establecer una estrategia para su identificación.Métodos: Se evaluaron muestras de orina colectadas antes y después de una administración oral de 10 mg de selegilina para verificar la funcionalidad de los métodos. Luego de una extracción líquido-líquido con terc-butil metiléter a pH alcalino se obtuvieron derivados R-α-metoxi-α-(trifluorometil)-fenilacetilo (R-MTPCl) y N-trifluoroacetamida (TFA) para el análisis por cromatografía de gases-espectrometría de masas. Se compararon los resultados sin y con formación de derivados N-TFA y R-MTPCl.Resultados: Los derivados N-TFA demostraron no ser una buena opción en ensayos de cuantificación debido a la formación de derivados múltiples. Sin embargo, su aplicación en procesos de identificación (al igual que el derivado R-MTPCl) permitió la obtención de fragmentos de alto valor diagnóstico en el espectro de masas. Luego de la eliminación de los metabolitos específicos de la selegilina, solo se observaron la anfetamina y metanfetamina. El uso del derivado R-MTPCl resolvió cromatográficamente los enantiómeros levo y dextro de ambos compuestos.Conclusiones: La evaluación de muestras que contienen anfetamina y metanfetamina-N-TFA permitió obtener espectros de masas con alto valor diagnóstico, pero no se recomienda en ensayos de cuantificación. El uso del reactivo de R-MTPCl incrementó la precisión en la identificación del fármaco original selegilina.

  • English

    Introduction: One of the challenges in doping control analysis is to demonstrate the preciseness and accuracy of the analytical results. Therefore, it is necessary to show evidence during the analysis of the samples about what exactly the athlete consumed. Selegiline is a stimulant substance synthesized from levo-methamphetamine. Its fundamental metabolites are L-amphetamine and L-methamphetamine which are also metabolites of other substances.Objective: To evaluate the formation of derivatives in the analysis of amphetamine and methamphetamine through three chromatographic parameters to establish a strategy for the identification of both compounds.Methods: Urine samples collected before and after oral administration of 10 mg of selegiline were evaluated to verify the functionality of the methods. After a liquid-liquid extraction with tert-butyl methylether at alkaline pH, R-α-methoxy-α-(trifluoromethyl)-phenylacetyl (R-MTPCl) and N-trifluoroacetamide (TFA) derivatives were obtained for analysis by gas chromatography-mass spectrometry. The outcomes without and with formation of N-TFA and R-MTPCl derivatives were compared.Results: N-TFA derivatives proved not to be a good option in quantification trials due to the formation of multiple derivatives. However, its application in identification processes (like the derivative R-MTPCl) allowed the obtention of fragments of high diagnostic value in the mass spectrum. After elimination of specific metabolites of selegiline, only amphetamine and methamphetamine were observed. The use of the derivative R-MTPCl chromatographically resolved the levo and dextro enantiomers of both compounds.Conclusions: The evaluation of samples containing amphetamine and methamphetamine-N-TFA allowed to obtain mass spectra with high diagnostic value, but it is not recommended in quantification tests. The use of the R-MTPCl reagent increased the accuracy in the identification of the original selegiline drug.