Purificación y caracterización de gonadotropina coriónica humana para uso diagnóstico

• Antonio Melchor-Rodríguez ^[1] ; Yaíma Zúñiga-Rosales ^[2] ; Orlando Zulueta-Rodríguez ^[1] ; Liliana Hernández-Pérez ^[1] ; Raquel López-Cisnero ^[1]
  1. [1] Centro de Inmunoensayo, Cuba
  2. [2] Centro Nacional de Genética Médica, Cuba.
• Localización: Revista Cubana de Química, ISSN-e 2224-5421, Vol. 31, Nº. 2, 2019, págs. 224-245
• Idioma: español
• Títulos paralelos:
  • Purification and characterization of human chorionic gonadotropin for diagnosis
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  • español

    En Cuba, el UMELISA HCG, producido por el Centro de Inmunoensayo, detecta la presencia de gonadotropina coriónica humana. Con el objetivo de purificar y caracterizar gonadotropina coriónica humana (hCG) para uso diagnóstico, se desarrolló un procedimiento para su obtención a partir de orina de gestantes, con una etapa de captura y una de purificación por cromatografía de inmunoafinidad, empleando un anticuerpo monoclonal anticadena β hCG. La mayor masa de hCG en el precipitado (74,27 %) se obtuvo al 50 % de saturación del (NH4)2SO4, 22 (C y 3 h de reposo. La actividad específica fue 12 417,65 UI/mg. El PAGE-SDS mostró las bandas de las cadenas α y β, con movilidad similar al control. La pureza por densitometría fue 97,3 %. Por filtración en gel se obtuvo una masa molar de 40 kDa. Con la metodología empleada se obtuvo gonadotropina coriónica humana con la calidad requerida para la obtención de los reactivos biológicos del UMELISAHCG.

  • English

    In Cuba, the UMELISA HCG, produced by the Immunoassay Center, detects the presence of human chorionic gonadotropin. With the aim to purify and characterize human chorionic gonadotropin (hCG) for diagnostic use, was developed a procedure for its purification from the urine of pregnant women, with a capture stage and a phase of immune affinity chromatography, using a monoclonal antibody anti-chain β hCG. The highest mass of hCG (74,27 %) in the precipite was obtained at 50 % saturation of (NH4)2SO4, 22 (C and 3 h of rest,. The specific activity was 12 417,65 IU/mg. PAGE-SDS showed the bands of the α and β chains of the hormone, with similar mobility to the control. The purity by densitometry was 97,3 %. By gel filtration a molar mass of 40 kDa was obtained. Using this procedure human chorionic gonadotropin with the required quality to get biological reagents for the UMELISA HCG was obtain.