Madrid, España
La clonación de árboles adultos, en los que se puede llevar a efecto la selección fenotípica evaluando confiabilidad los caracteres de interés, resulta a menudo imposible. En este trabajo referimos la regeneración completa, mediante embriogénesis somática, de plantas clónicas de árboles seleccionados de alcornoque. Se tomaron ramas de cinco árboles seleccionados en la finca “La Almoraima” (Cádiz), en las que se forzó la brotación. En las hojas brotadas se indujo la formación de embriones somáticos siguiendo un protocolo que establecimos previamente. Las hojas procedentes de los cinco árboles dieron lugar a cinco líneas embriogénicas, las cuales han sido la fuente de material para los estudios de conversión. En cada trasplante mensual a medio fresco de dichas líneas, se aislaron los embriones que mostraban maduración espontánea. Al cabo de ocho repicados se recolectaron 1.352 de estos embriones. Después de 8 semanas enfrío, germinaron un 41% en promedio, variando según genotipos entre un 32 y un 58%. Las plantas resultantes se transfirieron a condiciones ex vitro, mostrando crecimiento activo un 49 % de las mismas, entre el 31 y el 59 %dependiendo del genotipo. Aunque el paso más crítico ha sido la transferencia a condiciones de baja humedad ambiental, se han conseguido aclimatar completamente algunas plantas.
Cloning mature forest trees, in which reliable phenotypic selection based on desired traits could be carried out,is often impossible. In this work we refer the complete regeneration by somatic embryogenesis, of clonal plants from selected cork oak trees. Branches of five selected trees were collected in “La Almoraima” (Cádiz) and later they were forced to sprout. The formation of somatic embryos was induced in expanding leaves following a protocol that we defined previously. Leaves coming from the five trees gave origin to five embryogenic lines, that have been the material source for the conversion studies. Embryos that showed spontaneous maturation were isolated from these lines at each monthly subculture to fresh medium. After eight subcultures, 1.352 mature embryos were gathered. Following 8 weeks in cold storage, 41 % in average of these embryos germinated, ranging from 32 to 58 % depending on the genotype, when they were placed in germinating conditions. The resulting plants were transferred to ex vitro conditions, 49 % of them showing active growth, ranging from 31 to 59 % depending on the genotype. Although some plants have been completely acclimatised, the transfer to low humidity conditions remains the most critical step.
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