Resumen de La vía del receptor ep4 de la prostaglandina e2 y de la 15-hidroxiprostaglandina deshidrogenesa en el cáncer de pulmón de célula no pequeña: relevancia clinicopatológica
El cáncer de pulmón se encuentra entre las neoplasias más frecuentes en los países desarrollados y es una de las pocas que continúa mostrando una incidencia creciente a nivel mundial. En hombres es la primera causa de muerte por cáncer y la segunda en mujeres. El setenta por ciento de los casos son diagnosticados en fases avanzadas de la enfermedad y por lo tanto irresecables.
El tratamiento en estas fases de la enfermedad se basa en la administración de fármacos, en su mayor parte citotóxicos, con el propósito de mejorar la calidad de vida de los pacientes, aumentar el intervalo libre de progresión y en el mejor de los casos incrementar la supervivencia en unos meses. Por todo ello es necesario seguir investigando en nuevas estrategias terapéuticas que nos permitan mejorar la efectividad de los tratamientos actuales.
La finalidad de esta tesis ha sido profundizar en el papel de las prostaglandinas en el desarrollo y progresión del cáncer de pulmón con el objetivo de encontrar nuevas dianas terapéuticas que nos permitan mejorar los resultados de eficacia de los tratamientos actuales. En primer lugar estudiamos los efectos de la inhibición del receptor EP4 de la prostaglandina E2 (PGE2) sobre los mecanismos implicados en la formación de metástasis y en segundo lugar los efectos de la inhibición del receptor del factor de crecimiento epidérmico (EGFR) sobre la enzima 15-hidroxiprostaglandina deshidrogenasa (15-PGDH), encargada del catabolismo de las prostaglandinas.
Para el estudio del receptor EP4 elegimos células murinas de cáncer de pulmón, las 3LL o células de Lewis, debido a que estudios previos realizados por nuestro grupo demostraron una reducción en el número y tamaño de metástasis pulmonares en ratones tratados con un antagonista específico del receptor EP4. Analizamos el papel del receptor EP4 en los mecanismos celulares implicados en la formación de metástasis. Para ello diseñamos ensayos de adhesión, migración, invasión, formación de colonias y proliferación.
Tratamos a las células con PGE2, un agonista específico del receptor EP4 (ONO-AE1-734) y un antagonista específico (ONO-AE3-208). También creamos un vector con ácido ribonucleico de interferencia del receptor EP4 con el objetivo de anular su expresión y evaluar los efectos sobre dichos mecanismos.
Los resultados nos indicaron que el receptor EP4 de la PGE2 tiene un papel en los mecanismos implicados directamente en la capacidad de las células neoplásicas de metastatizar pero no influye directamente en el crecimiento tumoral. Además, los ensayos moleculares revelaron que la inhibición del receptor bloquea la vía de señalización PI3K/Akt, sugiriendo un papel en la supervivencia celular.
La segunda parte de esta tesis se centró en el estudio de la regulación de la enzima 15-PGDH. Nuestra hipótesis fue que el EGFR podría desempeñar un Resumen 21 Resumen / Resum / Summary papel relevante en la regulación de esta enzima. Primeramente, se evaluaron los niveles de expresión de la 15-PGDH en varias líneas celulares de cáncer de pulmón y en tejido tumoral. Los resultados confirmaron que en la mayoría de ellos los niveles de la enzima se encontraban disminuidos respecto al epitelio pulmonar sano. Posteriormente se llevaron a cabo ensayos con líneas celulares de cáncer de pulmón tratadas con un inhibidor de la tirosin quinasa del EGFR (erlotinib). Los resultados demostraron que en determinadas líneas celulares de cáncer de pulmón la inhibición del EGFR causaba un incremento en la expresión de la 15-PGDH y, como consecuencia, una disminución de los niveles de la PGE2. Sin embargo, las células cuyos niveles de 15-PGDH no se vieron modificados por la inhibición del EGFR, también presentaron una reducción de los niveles de PGE2 atribuibles a la reducción de los niveles de la ciclooxigenasa 2 (COX-2) observados tras el tratamiento con erlotinib.
Por último, se evaluaron las dos principales vías de transducción de señal del EGFR: (1) la vía de la PI3K/Akt y (2) la vía de Ras/MEK/ERK. Para llevar a cabo estos experimentos, se utilizaron inhibidores específicos de cada una de las dos vías y se determinaron los niveles de expresión de la 15-PGDH.
Los ensayos de inmunotransferencia mostraron un incremento en los niveles de la 15-PGDH cuando se inhibía la vía de Ras/MEK/ERK, mientras que por el contrario no se modificaban al inhibir la vía de la PI3K/Akt, sugiriendo que la regulación de los niveles de la 15-PGDH está mediada por la vía de Ras/ MEK/ERK.
En conclusión, los resultados de esta tesis muestran cómo la inhibición del receptor EP4 de la PGE2 y la restitución de los niveles de 15-PGDH tienen efectos antitumorales y nos proporcionan información para una mejor comprensión de la patogénesis del cáncer de pulmón y para el desarrollo de nuevas estrategias terapéuticas.
