Desarrollo y evaluación de nuevas técnicas inmunológicas y genéticas para el diagnóstico rápido de las infecciones respiratorias
- Autores: José Antonio Domínguez Benítez
- Directores de la Tesis: Vicente Ausina Ruiz (dir. tes.)
- Lectura: En la Universitat Autònoma de Barcelona ( España ) en 2000
- Idioma: español
- Tribunal Calificador de la Tesis: Francisco Gudiol Munté (presid.), Pedro Coll Figa (secret.), Albert Pahissa (voc.), Lucia Ortega Enciso (voc.), Rogelio Martín Alvarez (voc.)
- Materias:
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- Resumen
El diagnóstico de las neumonías plantea más dificultades que el de cualquier otro síndrome infeccioso. El objetivo principal del presente trabajo fue desarrollar, estandarizar y evaluar nuevas técnicas inmunológicas y técnicas de amplificación genética para un diagnóstico rápido, sensible y específico que posibilitara una orientación terapeútica adecuada y precoz de las infecciones respiratorias.
Hemos estadarizado un EIA para la detección de PCA en suero y orina.
La técnica mostró en suero una sensibilidad en las neumonías neurmocócicas bacteriémicas del 60% y del 39,1% en las no bacteriémicas, mostrándose muy poco útil en la detección de PCA en orina.
También hemos evaluado la utilidad de una inmunocromatografía ICT para la detección de PnC de S. Pneumoniae en orina. La ICT permitió detectar todos los serotipos en orina con sensibilidad de 80,4%. Hemos abordado también la estadarización de una nested-PCR para la amplificación de un fragmento del gen de la neumolisina en suero, comparándola con una single-PCR.
Los resultados demostraron que la utilización de una nested-PCR sobre una singel-PCR es obligada para la detección de DNA neumocócico y también la conveniencia de incorporar controles internos de amplifiacación. Evaluamos la aplicabilidad de técnicas de detección de antígeno enorina en el diagnósitco de la legionelosis. Evaluamos un ROA para la detección de Legionella pneumophila s. 1, incidiendo en la mejora de la sensibilidad y de la especificidad de la técnica mediante desproteinización de la orina y concentración del antígeno. El ROA es una prueba rápida, muy sensible y específica. La concentración del antígeno por utlrafiltración selectiva incrementa la sensibilidad sin detrimento de la especificidad. También se estudió la aplicabilidad de un EOA para la detección de L.pneumophila s. 1 comparándolo con el RIA.
Finalmente, evaluamos la utilidad de unEIA para la detec
