Resumen de Aillament i analisi de microsatel.Lits al gen de la fibrosi quistica: aplicacio de la seva variabilitat a la caracteritzacio i evolucio de mutacions
El treball realitzat en aquesta tesi s'ha dirigit a l'estudi de microsatèl.lits dins el gen CFTR i la seva associació amb mutacions. S'ha aïllat i caracteritzat un microsatèl.lit tipus CA/GT, localitzat a l'intró 8 de CFTR. L'anàlisi en cromosomes portadora de la mutació ¿F508, ha indicat que el mecanisme que dona lloc a la variabilitat en aquest marcador és el relliscament de les polimerases en la replicació i reparació de l'ADN, més que no pas la recombinació desigual. L'anàlisi d'aquest, i de dos microsatèl.lits més localitzats a l'intró 17b, en famílies espanyoles, ha indicat que són marcadors útils per a l'anàlisi genètica, amb heterozigositats d'entre el 38% i el 85%, essent la taxa de formació d'al¿lels nous, de 3,3xl0-4/locus/gàmet/generació. L'amplificació simultània dels tres microsatèl.lits permet augmentar l'heterozigositat fins al 95%. Aquesta anàlisi ha permès detectar la presència d'una deleció de 50 kb al gen CFTR que implica els exons, 4 a 7 i 11 a 18. S'han analitzat els tres microsatèl.lits en cromosomes portadors de mutacions molt poc freqüents, i s'han determinat associacions haplotip/mutació molt específiques, que faciliten el crivellatge d'aquestes mutacions en cromosomes FQ. L'obtenció d'haplotips associats a les mutacions ¿F508, G542X, i N1303K, ha permès de seguir la seva evolució a través de la variabilitat d'haplotips observada per cadascuna de les mutacions, alhora que ha permès d'estimar l'edat mínima d'introducció a Espanya en 53.000, 34.000 i 35.000 anys, respectivament. L'anàlisi dels microsatèl.lits en cromosomes ¿FS08 d'Origen europeu ha indicat que aquesta mutació ca va originar fa un mínim de 65.000 anys, i va ser escampada por Europa on una primera expansió durant l'època Paleolítica, i en una segona expansió durant el Neolític.
