Identificación de dos isoformas de glutaminasa en cerebro de mamíferos

• Autores: Lucía Olalla Martín
• Directores de la Tesis: Juan Carlos Aledo (dir. tes.), Antonia Gutiérrez Pérez (codir. tes.)
• Lectura: En la Universidad de Málaga ( España ) en 2002
• Idioma: español
• Tribunal Calificador de la Tesis: Ignacio Núñez de Castro (S.J.) (presid.), Zafar Iqbal Khan (secret.), Joan Seoane Suarez (voc.), Ángel Nadal Navajas (voc.), Ana María Pérez Castillo (voc.)
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• Resumen

  • En mamíferos, existen dos genes diferentes que codifican dos isoformas de glutaminasa denominadas tipo hígado (LGA) y tipo riñón (KGA). Siempre se había considerado que la proteína LGA estaba únicamente presente en mitocondrias de hígado, mientras que era la glutaiminasa tipo K, la expresada por el resto de los órganos con actividad glutaminasa. Sin embargo, en este trabajo describimos la presencia de dos isoformas de glutaminasa (KGA y LGA) en cerebro de diversos mamíferos. Además, se realiza un estudio de la distribución regional, celular y subcelular de ambas proteínas en cerebro de rata y mono, mediante técnicas inmunocitoquímicas, utilizando anticuerpos isoforma específicos. La proteína LGA apareció mayoritariamente en los núcleos de las células neuronales, mientras que la localización de la glutaminasa tipo K fue mitocondrial.

    Los estudios realizados muestran además que tanto LGA como KGA se encuentran mayoritariamente en células glutamatérgicas, aunque también son expresadas por neuronas de naturaleza GABAérgica. Existe una alta correlación entre LGA y KGA tanto a nivel del mRNA como de proteína, de hecho, existen multitud de células que coexpresan ambas isoformas de glutaminasa.

    Mediante el sistema del doble híbrido en levaduras, aislamos una nueva proteína, denominada GIP (Glutaminase Interacting Protein), que interacciona con LGA pero no con KGA. Se realizó un estudio de la distribución regional, celular y subcelular de esta proteína, que contiene un dominado PDZ, en cerebro de rata y mono, revelándose una localización tanto mitocondrial como no mitocondrial, expresándose mayoritariamente en astrocitos. La capacidad de LGA de interaccionar con proteínas que contengan dominios PDZ, no necesariamente la GIP, podría estar relacionada con la localización subcelular diferencial de ambas glutaminasas en cerebro.