Resumen de Caracterización de una nueva tóxima producida por pseudomonas syringae pv. Syringae: mangotoxina. Biosíntesis y papel en la patogénesis
Pseudomonas syringae pv. Syringae es una bacteria frecuentemente aislada de numerosas plantas y el agente causal de la necrosis apical del mango.
La toxina antimetabolito producida por cepas de P. Syringae pv. Syringae y denominada mangotoxina, se detectó mediante el ensayo de inhibición del crecimiento de Escherichia coli, inhibición que revertía en presencia de L-ornitina, pero no de N-acetil ornitina, por lo que se podía deducir que afectaba a la ruta de síntesis de ornitina/arginina. Filtrados libres de células de cepas productoras de mangotoxina provocan una fuerte disminución de la actividad ornitina acetiltransferasa (OAT) en extractos proteicos de foliolos de tomate, lo que confirma a dicha enzima como diana de esta toxina. Diferentes tratamientos fisico-químicos sugieren la mangotoxina es un oligopéptido hidrofilico sin una estructura secundaria compleja (sensible a proteasas, pero estable a altas temperaturas y pH estremos) como otras toxinas antimetabolito, tales como tabtoxina y faselotoxina. Mediante HPLC, la actividad de la mangotoxina se asoció a un único pico presente en filtrados libres de células de una cepa productora, y que no se detecta en los de una cepa mutante defectiva en la producción de la toxina.
Para el análisis de los genes implicados en producción de mangotoxina en la cepa UMAF0158 de Pseudomonas syringgae pv, syringae se construyeron mutantes defectivos en la producción de esta toxina. El estudio de las secuencias nucleotídicas de los genes mutagenizados mostraron, en un primer acercamiento, homologías con genes de regulación bacteriana como gacA y lemA, con una péptidosintasa no ribosomal, con una acetiltransferasa y con una tiorredoxina/lipoproteína, entre otros. Un análisis más exhaustivo de la región genómica clonada en pCG2-6 y que restauraba la producción de mangotoxina en el mutante defectivo en la producción de mangotoxina UMAF0158-6yF6, mostró que una péptidosintasa
