Resumen de Mecanismos moleculares de la apoptosis linfocitaria inducida por inyección de enterotoxina termolábil de e.coli

Esther Tamayo Revuelta

• Desde hace algunos años se investiga el uso potencial de la enterotoxina termolábil de E. Coli (LT), como adyuvante de vacunas administrables en superficies mucosas. Con este objeto se desarrolla una intensa actividad investigadora que intenta esclarecer los mecanismos implicados en el efecto adyuvante de LT, entre los cuales se han implicado: la activación de las células presentadoras de antígeno, la inducción de moléculas coestimuladoras en linfocitos T y B o la apoptosis de las células inmunocompetentes. Otra cuestión que compromete el uso clínico de LT es su alta toxicidad, asociada a la acción ADP-ribosilasa de su subunidad A. Por ello se han desarrollado mutantes de LT con baja o nula toxicidad y se está evaluando su poder adyuvante en vacunación en mucosas.

  Metodología, hipótesis y plan de trabajo: Nuestro trabajo se centra en la capacidad de LT para inducir muerte celular aopotótica in-vivo, utilizando una aproximación experimental en varias estripes murinas. Pretendemos estudiar cuáles son las poblaciones inmunocompetentes implicadas en este efecto aopotótico en los diferentes tejidos linfoides (timo, médula ósea, bazo, ganglios linfáticos, sangre) según la vía de administración de LT. Valoraremos la implicación de las diferentes rutas moleculares de producción de muerte celular por apoptosis, así como los mecanismos fisiológicos inductores (papel de los corticoides endógenos). Además se estudiará si la apoptosis está ligada a la actividad enzimática-tóxica de LT. Por último se valorará sie el efecto de apoptosis de células inmunocompetentes es un proceso necesario en la capacidad adyuvante en mucosas de la LT.

  Para desarrollar estos estudios experimentales se emplearán técnicas de manipulación de animales de experimentación (inmunización de ratone s por diferentes rutas: intraperitoneal, nasal, intragástrica, ...; extracción de muestras de sangre y tejidos), técnicas de detección de poblaciones celulares (c