Estudio de polimorfismos genéticos asociados a dislipemias y respuesta a dieta
- Autores: Isabel de Castro Orós
- Directores de la Tesis: Miguel Pocoví Mieras (dir. tes.), Pilar Mozas (dir. tes.)
- Lectura: En la Universidad de Zaragoza ( España ) en 2009
- Idioma: español
- Tribunal Calificador de la Tesis: José Carlos Rodríguez Rey (presid.), José Puzo Foncillas (secret.), Fernando Civeira Murillo (voc.), Carmen Garces Segura (voc.), Emilio Ros Rahola (voc.)
- Materias:
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- Resumen
La Organización Mundial de la Salud publicó que en el año 2005 murieron 7 millones y medio de personas por enfermedad cardiovascular, siendo esta la principal causa de mortalidad en los países desarrollados. Las enfermedades cardiovasculares son debidas a la acumulación de lípidos en las arterias y la consecuente formación de placa de ateroma, desencadenada por alteraciones en el metabolismo de los lípidos, denominadas dislipemias.
Los objetivos planteados para el desarrollo de esta tesis doctoral fueron: 1. Identificar las técnicas más adecuadas para analizar polimorfismos de un sólo nucleótido (SNPs) en función de las características de los genes y posición de, los mismos.
2. Conocer si las variantes alélicas de los genes ABCGS, ABCG8, CYP7A1 y USF1 están asociadas con el desarrollo de Hiperlipemia Familiar Combinada (HFC) y las Hipercolesterolemias Autosómicas Dominantes no dependientes del receptor LDL ni de APOB (ADH).
3. Conocer si los genes ABCG5, ABCGB, y CYP7A1 interaccionan conlarespuesta a dienta enriquecida con esteroles vegetales.
4. Establecer la funcionalidad dé los SNPs en las regiones promotoras que interactúen con el efecto dietético de los esteroles vegetales y relacionar esta funcionalidad con la respuesta hipolipemiante.
Para el desarrollo de estos estudios se utilizaron técnicas de biología molecular, celular e ingeniería genética: amplificación de fragmentos genómicos por PCR, digestión con enzimas de restricción, secuenciación, pirosecuenciación, extensión de cebadores, donación, cultivos bacterianos y celulares, análisis in silico de secuencias genómicas y análisis estadístio.
El análisis de los resultados obtenidos en este trabajo nos permitió concluir que: 1. Varios loci implicados en la absorción intestinal de colesterol y la síntesis de ácidos biliares son responsables, en parte, de la expresión de las Hlpercolesterolemias Autosómicas Dominantes no dependientes de receptor LDL ni APOB (ADH).
2. Los sujetos ADH presentan asociación con el SNP D19H del gen ABCG8.
3. El polimorfismo -204A>C del gen de la colesterol 7alfa-hidroxilasa (CYP7A1) está asociado, en mujeres con ADH con la variabilidad de las concentraciones de colesterol total (CT) y colesterol LDL (cLDL) y en varones con la variabilidad de loa -triglicéridos (TG).
4. E1SNP usflsl del gen USF1 está asociado con HFC, concretamente con las concentraciones de CT y cLDL.
5. El polimorfismo usfls7 del USFl presentó asociación con las concentraciones de colesterol HDL (cHDL) tanto en individuos normofipidémicos como en sujetos con HFC.
6. El polimorfismo Q604E del gen ABCG5 mostró una asociación significativa con las concentraciones de fitoesteroles y latosterol en sujetos hipercolesterolémicos sometidos a intervención dietética con este-roles vegetales (EV )_ 7. El SNP -19T>G del gen ABCG8 presentó asociación con las concentraciones de TG en varones somentidos a intervención dietética con EV.
8. Nuestros resultados revelaron una asociación del SNP D19H del gen ABCGB con los valores de cLDL y CT en los individuos somentidos a intervención dietética.
9: El SNP -204A>C del gen CYP7A1 presentó una fuerte asociación con las concentraciones de latosterol y precursores de colesterol, así como cóncampestérol, sitosterol y fitoesteroles totales en las mujeres sometidas a intervención con EV.
10. Los experimentos de retardo en gel en la región promotora del gen CYP7A1 muestran diferencias en la unión de proteínas nucleares en dependencia de la variante alélica del locus >204A>C.
11. El análisis de la actividad transcripcional llevado a cabo con el gen reporetero de la luciferasa demostró que el promotor de los portadores del alelo C del SNP -204A>C del gen CYP7A1 tiene una potencia de 4,5 veces superior a la del promotor de los portadores del alelo A.
12. La actividad transcripcional del promotor de CYP7A1 que contiene la variante C disminuye significativamente 8n presencia de los receptores nucleares CAR y RXR, mientras que la expresión del promotor con la variante A no sufre modificación.
13. El análisis de la actividad transcripcional realizado con el gen reportero de la lucifersara demostró que el promotor de los portadrores del alelo G del SNP-19T>G del gen ABCG8 tiene el doble de potencia que el promotor del alelo T.
