Resumen de Regulación por insulina de los enzimas clave de la vía glucolítica/gluconeogénica en cultivo primario de hepatocitos de rata obesa zucker (fa/fa)
Juan José Carrillo de la Fuente
Los hepatocitos de rata en cultivo primario sufren un proceso de desdiferenciación.
Por ello, en una primera etapa estudiamos el perfil fenotípico de la vía glucolítica/gluconeogénica en hepatocitos en cultivo. Así, observamos que se producía una rápida disminución de los nivels de actividad y mRNA de los enzimas clave de la vía gluconeogéncia durante la evolución del cultivo.
Estos cambios llevan a una marcada disminución de la capacidad gluconeogénica de los hepatocitos en cultivo en un plazo de 24 horas.
Por otra parte se estudió la resitencia a insulina, tanto a corto como a largo plazo, en cultivo primario de hapatocitos de ratas obesas Zucker (fa/fa). Estos mantienen en cultivo primario su fenotipo característico a nivel de la vía glucolítica/gluconeogéncia, durante al menos 24 horas.
Además, presentan resistencia de la vía glucolítica/gluconeogéncia a la modulación por sinsulina en sus acciona a corto plazo, fque se manifesta en ausencia de inhibición significativa por insulina de la gluconeogénesis y de la producción hepática de glucosa (glucogenolisis más gluconeogénesis), acompañada de una falta de activación de la PFK-2 y ausencia de cambios en la concentración de F-2,6-P2.
En cuanto a las acciones a largo plazo de la insulina, se observó resistencia a la modulación de la actividad PEPCK y la expresión de su correspondiente mansajero.
Por último, se estudiaron las vías de señalización implicadas en la activación a corto plazo de la PK-L por insulina. Así, se observó que en este proceso se requiere la activación de las vías de señaización de la p44/p42 MAPK y de la PI3-K. Además, es posible que sea necesaria la activación de la PKB, mientras que podemos descartar la participación de la p70 S6-K.
