Ritmos circadianos y neurotransmisores: Estudios en el cerebro de la rata despierta
- Autores: Tamara Rodriguez Castañeda
- Directores de la Tesis: Francisco Mora Teruel (dir. tes.)
- Lectura: En la Universidad Complutense de Madrid ( España ) en 2002
- Idioma: español
- Tribunal Calificador de la Tesis: Jesús A. Fernández-Tresguerres Hernández (presid.), Ana Isabel Esquifino Parras (secret.), Rubén V. Rial Planas (voc.), Carmen Guaza Rodriguez (voc.), Darío Acuña Castroviejo (voc.)
- Materias:
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- Resumen
En la presente tesis doctoral se ha investigado la posible presencia de ritmos circadianos en las concentraciones extacelulares de los neurotransmisores dopamina, acido glutamico y GABA, en el estriado y nucleo accumbens utilizando la tecnica de microdialisis. Se ha investigado tambien la influencia del factor ambiental luz (presencia o ausencia) sobre dichos ritmos. Para ello se ha seguido el siguiente protocolo experimental.
Diez-diecisiete dias tras la implantación esterotáxica de cánulas-guia, se llevan a cabo experimentos de microdiálisis en ratas Wistar macho despiertas, durante un ciclo oscuridad: luz: oscuridad (6h:12h:12h), un ciclo oscuridad: luz continua (6h:24h) y un ciclo oscuridad: oscuridad continua(6h:24h).
El procedimiento de microdiálisis consiste en una perfusión continua de líquido cefalorraquideo sintético, a un flujo de 1.25 ul/min a traves de una sonda de diseño concéntrico con una pequeña membrana dialítica que entra en contacto con el area a perfundir. La membrana es de una longitud de 4 mm en el caso del estriado y de 2 m en el caso del núcleo accumbens.
Este procedimiento permite la recogida de aminoácidos y catecolaminas presentes en el líquido extracelular. Las muestras se recogen cada 30 minutos, a lo largo de un periodo de 30 horas.
El contenido en aminoácidos y catecolaminas de las muestras se analiza mediante cromatografia liquida de alta resolución (HPLC) de fase reversa acopado a detección fluorométrica y electroquimica respectivamente.
Para el analisis estadistico de las variaciones de las concentraciones en el dializado en las transiciones de luz a oscuridad se utiliza un auste a un modelo sinusoidal junto con un analisis de regresion lineal.
