Vida intracelular de Corynebacterium pseudotuberculosis
- Autores: Justo Dario Valdivia Zevallos
- Directores de la Tesis: Fernando Real Valcárcel (dir. tes.), Begoña María Acosta Hernández (dir. tes.), Daniel Padilla Castillo (dir. tes.)
- Lectura: En la Universidad de Las Palmas de Gran Canaria ( España ) en 2015
- Idioma: español
- Tribunal Calificador de la Tesis: Antonio Jesús Fernández Rodríguez (presid.), María Soraya Déniz Suárez (secret.), José Ramos Vivas (voc.), Francisco Cuello Gijón (voc.), Noemí Castro Navarro (voc.)
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- Tesis en acceso abierto en: acceda
- Resumen
La infección por C. pseudotuberculosis tiene enorme trascendencia en medicina veterinaria. La difusión intraorgánica del agente causal se ve facilitada por la supervivencia en el interior de los macrófagos, actuando como un parásito intracelular facultativo. Pero de esta vida intracelular se desconocen muchos aspectos necesarios para entender la interacción parásito-hospedador.
En el presente trabajo hemos pretendido estudiar in vitro la interacción de cepas clínicas y de referencia de C. pseudotuberculosis con células no fagocíticas, analizar de forma comparada la interacción de esta bacteria con fagocitos murinos, ovinos y caprinos y el efecto bactericida del suero de cabra y oveja sobre este patógeno. Todas las cepas utilizadas fueron identificadas mediante métodos bioquímicos convencionales, así como mediante una PCR-multiplex para regiones específicas de los genes 16S rRNA y PLD.
Todas las cepas utilizadas en el presente trabajo son nitrato reductasa negativas y, por tanto, se corresponden con C. pseudotuberculosis biovar ovis. La invasión celular de esta bacteria sobre la línea celular no fagocítica FLK-BLV-044, replicándose ligeramente hasta las 24 horas y permaneciendo viable durante al menos 6 días. Los porcentajes de adherencia varían entre el 2 y el 1,5%, aunque no se observen diferencias estadísticamente significativas. La tasa de invasión disminuye de forma estadísticamente significativa por la presencia de azúcares. La bacteria se replica ligeramente hasta las 24 horas postinfección. La tasa de proliferación intracelular se situó alrededor de 1,08.
La tasa de fagocitosis de las cepas de C. pseudotuberculosis sobre la línea celular macrofágica J774 se encuentra entre 50,9 y el 66,6%. Los índices de proliferación intracelular quedaron establecidos en 0,26, lo cual indica que la bacteria no se replica activamente en el interior del macrófago, pero sí se produce la persistencia de, al menos, 72 horas postinfección. Ninguna de las cepas utilizadas produjo inhibición de la producción del contenido de peroxidasa. También se observó inhibición de la explosión respiratoria de los fagocitos de oveja.
Las cuatro cepas de C. pseudotuberculosis fueron susceptibles al efecto bactericida del suero de cabra mientras que, paralelamente, las mismas cepas analizadas fueron resistentes al efecto bactericida del suero de oveja.
