Parasitación de Cornu aspersum Müller, 1774 (Helicidae) por metacercarias del género Brachylaima sensu lato Dujardin, 1843 (Brachylaimidae): tratamiento antihelmíntico y consumo humano

• Autores: Laia Gállego Franco
• Directores de la Tesis: Mercedes Gracenea Zugarramurdi (dir. tes.)
• Lectura: En la Universitat de Barcelona ( España ) en 2017
• Idioma: español
• Tribunal Calificador de la Tesis: Santiago Mas Coma (presid.), Ana C. Calpena Campmany (secret.), Javier Lluch (voc.)
• Materias:
  • Ciencias de la vida
    • Biología animal (zoología)
      • Parasitología animal
  • Ciencias médicas
    • Patología
      • Parasitología
• Enlaces
  • Tesis en acceso abierto en: Dipòsit Digital de la UB
• Resumen

  • El caracol de consumo humano Cornu aspersum actúa como hospedador intermediario en el ciclo biológico de Brachylaima spp. albergando metacercarias libres en riñón. Su ingestión insuficientemente cocinados permitiría a las metacercarias originar adultos en el intestino humano causando la braquilaimosis, parasitosis con una mortalidad esperada del 5-10%, con casos humanos en Australia. Los objetivos de esta tesis fueron: determinar la prevalencia de metacercarias Brachylaima spp. en C. aspersum de consumo en mercados españoles; estudiar la dinámica de parasitación considerando la localización geográfica de los caracoles y la estacionalidad como factores de riesgo respecto a la exposición humana al parásito; describir la influencia de la importación de caracoles sobre la dispersión geográfica de Brachylaima spp.; evaluar la eficacia del praziquantel (PZQ) frente a metacercarias Brachylaima spp.; desarrollar un método bioanalítico mediante HPLC-MS/MS para determinar cualitativamente y cuantitativamente PZQ en el gasterópodo y evaluar mediante microscopía electrónica de transmisión (TEM) los efectos ultraestructurales producidos por el PZQ en metacercarias tratadas. Se analizó 3710 ejemplares de C. aspersum durante 5 años en mercados españoles [Barcelona (n=2525), Bilbao (n=207), Madrid (n=290), Tudela (n=301), Valencia (n=163) y Zaragoza (n=224)]. Se examinó individualmente el riñón y se registró la carga de metacercarias. Se calculó la prevalencia global (41’97%;95%IC:40’38%-45’56%), por ciudad y por mercado en el caso de Barcelona y la estacionalidad (↑otoño). El modelo de regresión logística que mide la probabilidad de adquirir caracoles parasitados utilizando la ciudad y la estación como predictores (79% de acierto global), mostró riesgo significativo (p=0.001) en interacciones Tudela-Otoño (4.330-78.584) y Barcelona-Otoño (2.551-38.442). Se determinó la prevalencia de metacercarias en caracoles importados de Argelia y Sudáfrica obteniéndose adultos experimentales cuya aproximación específica se realizó mediante análisis morfométrico comparativo con adultos B. mascomai y B. llobregatensis. Se emplearon 18 variables morfométricas aplicándose MANOVA y Análisis de Componentes Principales, mostrando superposición B. llobregatensis/Adultos argelinos y B. mascomai/Adultos sudafricanos. La eficacia de PZQ frente a metacercarias Brachylaima spp. en C. aspersum se evaluó mediante dos ensayos (VICH GL7): de determinación de la dosis adecuada para conseguir una reducción de la carga parasitaria igual o superior al 90% y de confirmación de dosis. Se administró PZQ a los caracoles vía oral en el pienso de engorde. El método analítico HPLC-MS/MS se desarrolló siguiendo la guía EMEA/CHMP/EWP/192217/2009 de la EMA. En el ensayo de determinación de dosis se testaron tres dosis individualmente (n=300, 10 días): 1’2mgPZQ/caracol, 1’8mgPZQ/caracol (eficacia 97’3 %, p<0.001) y 2’4mgPZQ/caracol (eficacia 98’7%, p<0.001). En el test de confirmación de dosis (n=200) se ensayó 2’4 mg/caracol en grupo (10 caracoles/caja, 7 días) (eficacia 94’6%,p<0.001). La prevalencia disminuyó del 68’7% en el grupo control al 10.1% en el grupo tratamiento, p<0.001. La dosis recibida correspondió a 200’2mgPZQ/kg de caracol con concha. En el método analítico se evaluaron la linealidad rangos 0’05-0’8µg/ml y 0’8-6µg/ml (r2=0’99), el límite de cuantificación inferior (0’05 µg/ml), la selectividad, el efecto de arrastre, la exactitud variaciones nominales inferiores al ±20%,, la precisión manteniéndose en el intervalo de 15-20%, la integridad de la dilución, el efecto matriz (%CV=10’86 y %CV=10’01) y la estabilidad. Se determinó cuantitativamente el residuo de praziquantel (n=60) en caracoles tratados (11mgPZQ/g pienso), siendo de 0’093 mgPZQ/g caracol (10% del PZQ teóricamente ingerido). Los efectos ultraestructurales del praziquantel en metacercarias recuperadas de C. aspersum tratados individualmente (1’2 mgPZQ/caracol y 2’4 mgPZQ/caracol) y en grupo (2’4mgPZQ/caracol ad libitum durante 7 días) mostraron pérdida de la orientación característica de los cuerpos celulares tegumentarios T2 y mitocondrias observada en las metacercarias control, alteración mitocondrial y de los cuerpos celulares tegumentarios T2, ya a nivel de las células tegumentarias. La contracción del sistema digestivo fue tan severa que el lumen no pudo apreciarse.