Los ácidos grasos poliinsaturados disminuyen la expresión in vitro de la proteína NPC1L1, clave en la absorción intestinal de colesterol
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[1] Universitat Rovira i Virgili
Universitat Rovira i Virgili
Tarragona, España
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- Localización: Clínica e investigación en arteriosclerosis, ISSN 0214-9168, ISSN-e 1578-1879, Vol. 20, Nº. 5, 2008, págs. 200-206
- Idioma: español
- Títulos paralelos:
- Polyunsaturated fatty acids down-regulate in vitro expression of the key intestinal cholesterol absorption protein NPC1L1
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Resumen
- español
Introducción La absorción intestinal de colesterol está regulada por diversas proteínas transportadoras, donde NPC1L1 desempeña un papel crucial. Los ácidos grasos (AG) modulan la absorción de colesterol por un mecanismo desconocido.
Objetivos Evaluar los efectos de los AG saturados (AGS), monoinsaturados (AGMI) y poliinsaturados (AGPI) sobre la expresión de NPC1L1 y estudiar su posible regulación a través de los receptores nucleares PPARγ, PPARδ, LXR y RXR.
Métodos Se incubaron enterocitos Caco-2/TC-7 durante 24 h con concentraciones no tóxicas (50, 100, 200 y 300 μM) de los diferentes AG y también con agonistas PPARγ (rosiglitazona), PPARδ (GW501516), LXR (T0901317) y RXR (9-cis ácido retinoico). La expresión génica de NPC1L1 se analizó por transcripción inversa de la reacción en cadena de la polimerasa cuantitativa a tiempo real y la expresión de la proteína localizada en la membrana de los enterocitos se analizó por Western blot.
Resultados Los AG poliinsaturados n-3, EPA y DHA, disminuyeron significativamente los valores de ARNm de NPC1L1 entre un 35-58% (p < 0,05). Los ácidos linoleico (LA, n-6), palmítico (PA) yoleico (OA, n-9) no mostraron ningún efecto en losvalores de ARNm de NPC1L1. Los agonistas LXR y LXR+RXR disminuyeron los valores de ARNm de NPC1L1 un 28 y un 57%, respectivamente (p < 0,05). EPA y DHA a una concentración de 200 μM disminuyeron la expresión de la proteína NPC1L1 un 58 y un 59%, respectivamente.
Conclusiones Hemos demostrado que los AGPI n-3, EPA y DHA disminuyen in vitro los valores de ARNm de NPC1L1 en células Caco-2/TC-7. Además, los n-3 también disminuyen la expresión de la proteína en la membrana de los enterocitos. La activación de LXR y RXR induceun efecto inhibitorio similar. El efecto hipolipemiante de los n-3 puede estar mediado, en parte, por su actuación sobre la expresión de NPC1L1.
- English
Background Several transporter proteins regulate intestinal cholesterol absorption. Of these proteins, NPC1L1 plays a major role to this process. Fatty acids (FA) modulate cholesterol absorption by a mechanism that remains unknown.
Objectives To evaluate the effect of saturated (SFA), monounsaturated (MUFA), and polyunsaturated (PUFA) fatty acids on the expression of NPC1L1 in human enterocytes in vitro and to study the role of the nuclear receptors PPARγ PPARδ, LXR and RXR.
Methods Caco-2/TC-7 enterocytes were incubated for 24 h with non-cytotoxic concentrations (50, 100, 200 and 300 μM) of the different FA. NPC1L1 gene expression was analyzed by quantitative rtPCR and the protein present in enterocyte membranes was analyzed by western blot.
Results NPC1L1 mRNA levels were reduced 35 to 58% by the n-3 PUFA, EPA and DHA (p < 0.05). LA (n-6), PA, and OA did not affect NPC1L1 mRNA expression. ABCA1 mRNA levels were reduced 44 to 70% by n-6 AA and 43 to 55% by n-3 EPA (p < 0.05). LXR and LXR+RXR agonists decreased NPC1L1 mRNA expression by 28 and 57%, respectively (p < 0.05). A concentration of 200 μM of EPA and DHA decreased NPC1L1 protein expression in enterocyte membranes by 58% and 59%, respectively.
Conclusions We have demonstrated that the PUFAs n-3 EPA and DHA down-regulate NPC1L1 mRNA expression in vitro. In addition, PUFA also down-regulate NPC1L1 protein expression in enterocyte membranes. LXR and RXR activation induced a similar repression effect. The lipid lowering effect of n-3 PUFA could be mediated in part by their action at the NPC1L1 gene level.
- español
