Resumen de Incremento del contenido de lipídos y de ácidos grasos poliinsaturados de una cepa de tetraselmis tetrathele a través de mutación-selección

Roraysi Cortez, Miguel Guevara, Richard Bauza, Luis Freites, Diagnora Brito, Néstor Rosales, César Lodeiros

• español

  Con la finalidad de evaluar la mutación-selección como estrategia de mejoramiento genético, se sometió a la microalga Tetraselmis tetrathele a diferentes tiempos de exposición con el mutágeno etil metano sulfonato (EMS). Los posibles mutantes con acumulación incrementada de lípidos y ácidos grasos poliinsaturados (PUFAs) fueron seleccionados utilizando Quizalofop (100µM), un inhibidor de la síntesis de lípidos. Dos cepas mutantes del alga (15c y 30a) fueron seleccionadas y comparadas con la cepa silvestre en cuanto a crecimiento, contenido de lípidos totales y PUFAs. El crecimiento de las cepas 15c y 30a fue similar (P>0,05) al de la cepa silvestre, con densidades celulares máximas de 1,5×106 ; 1,3×106 y 1,5×106 células/ml, respectivamente.

  Los lípidos totales de las dos mutantes fueron 85 y 62%, respectivamente, superiores que los de la cepa silvestre (8,8 ±0,32%). Los contenidos de ácido araquidónico de las cepas 15c y 30a fueron 92 y 90%, respectivamente, más altos que los de la cepa silvestre (4,0%). Los valores de los ácidos eicosapentanóico y docosahexaenóico en los dos mutantes superaron en más de 25% a los obtenidos en la cepa silvestre.

  Los resultados demuestran la utilidad de la mutación-selección como estrategia para mejorar genéticamente a T. tetrathele, por ser una técnica ventajosa cuando se desconocen los mecanismos de regulación de los genes que participan en la biosíntesis del compuesto de interés o cuando las metodologías de mutagé- nesis sitio-dirigida y transgenia están poco desarrolladas, como es el caso de la mayoría de las microalgas.

• English

  The microalga Tetraselmis tetrathele was exposed to the mutagen ethyl methane sulfonate (EMS) in order to evaluate the mutation-selection as a strategy of genetic improvement.

  The possible mutants with increased accumulation of lipids and polyunsaturated fatty acids (PUFAs) were selected using Quizalofop (100µM), an inhibitor of lipid synthesis. Two mutant strains (15c and 30a) were selected and compared with the wild strain in its growth, contents of total lipids and PUFAs.

  Growth of the 15c and 30a mutants was similar (P>0.05) to that shown by the wild strain, with maximum cell density of 1,5×106 ; 1,3×106 y 1,5×106 cells/ml, respectively. The total lipids of mutants 15c and 30a were 85 and 62%, respectively, higher than the wild strain (8.8 ±0.32%). The contents of arachidonic acid for 15c and 30a strains were 92 and 90%, respectively, higher than the wild strain (4.0%). Eicosapentaenoic acid and docosahexaenoic acid values measured in the two mutants exceeded by more than 25% to those obtained in the wild strain.

  The results demonstrate the usefulness of the mutation-selection as a strategy to genetically improve T. tetrathele, being an advantageous technique when unknown mechanisms of regulation of the genes involved in the biosynthesis of the compound of interest or when site-directed mutagenesis and transgenic methodologies are poorly developed, as it is the case with the majority of microalgae

• português

  A fim de avaliar a mutação-seleção como a melhor estratégia de melhoramento genético, uma cepa da microalga Tetraselmis tetrathele foi submetida a diferentes tempos de exposição ao agente mutagênico etil metano sulfonato (EMS). Mutantes potenciais com aumento da acumulação de lipídeos e ácidos graxos poliinsaturados (PUFAs) foram selecionadas utilizando Quizalofop (100µM), um inibidor da síntese de lipídios. Duas cepas mutantes da alga (15c e 30a) foram selecionadas e comparadas com a cepa selvagem em quanto seu crescimento, teor de lipí- dios totais e ácidos graxos poliinsaturados. O crescimento das mutantes 15c e 30a foi semelhante (P>0,05) ao mostrado pela cepa selvagem, com densidades máximas de células de 1,5×106 ;

  1,3×106 y 1,5×106 células/ml, respectivamente. Lipídeos totais das mutantes foram 85 e 62%, respectivamente, maior do que na estirpe selvagem (8,8 ±0,32%). O conteúdo de ácido araquidónico das estirpes 15c e 30a foram de 92 e 90%, respectivamente, mais elevados que os da estirpe selvagem (4,0%). Os valores dos ácidos eicosapentaenóico e docosahexaenóico nos dois mutantes excedeu mais do que 25% de aqueles obtidos na estirpe selvagem.

  Os resultados demonstram a utilidade de mutação-seleção, como uma estratégia para melhorar geneticamente T. tetrathele, por ser uma técnica vantajosa quando os mecanismos de regulação dos genes envolvidos na via de biossíntese do composto de interesse são desconhecidos ou quando as metodologias por mutagênese dirigida y transgenia são pouco desenvolvidas, como é o caso para a maior parte das microalgas.