Short communication. of type-I porcine reproductive and respiratory syndrome virus vaccines and field strains by restriction fragment length polymorphism analysis

• Autores: Francisco Díez Fuertes, A. Vázquez, L. Hornillos Gumiel, I. Simarro, J.M. Castro, Francisco Javier Martínez Lobo
• Localización: Spanish journal of agricultural research, ISSN-e 2171-9292, ISSN 1695-971X, Vol. 10, Nº. 1, 2012, págs. 74-77
• Idioma: inglés
• Títulos paralelos:
  • Comunicación corta. Diferenciación de cepas vacunales del virus del síndrome reproductor y respiratorio porcino de tipo I y cepas de campo por análisis de polimorfismos en la longitud de fragmentos de restricción
• Enlaces
  • Texto completo (pdf)
• Resumen
  • español

    Para controlar la infección por el virus del síndrome reproductor y respiratorio porcino (PRRSV), en la gran mayo-ría de países de América, Asia y Europa, incluyendo España, se usan frecuentemente vacunas basadas en virus vivos modificados (MLV). En la actualidad existen técnicas discriminatorias que permiten detectar cepas vacunales del PRRSV de tipo II. El presente trabajo describe una técnica precisa y rápida para la diferenciación de cepas vacunales de tipo I del PRRSV y cepas de campo españolas. Esta técnica se basa en la transcripción reversa y posterior amplifi-cación de la ORF5 del genoma del PRRSV utilizando la reacción en cadena de la polimerasa anidada, seguida de la digestión de los amplicones generados con dos endonucleasas específicas: ItaI y AccI. La utilización combinada de ambas enzimas genera patrones de polimorfismos en la longitud de fragmentos de restricción (RFLP), adecuados para la distinción de las 30 cepas de campo usadas, de las cuales 12 fueron aisladas entre 1991 y 1995 y 18 entre 2000 y 2003. Estos diferentes patrones pueden ser utilizados para distinguir entre cepas de campo españolas del PRRSV y las tres cepas vacunales de tipo I usadas en España: AmervacPRRS®, Pyrsvac-183® y PorcilisPRRS®.

  • English

    The use of modified live virus (MLV) vaccines is a common procedure to control porcine reproductive and respiratory syndrome virus (PRRSV) infection in the great majority of countries from America, Asia and Europe, including Spain. Current discriminatory techniques allow the detection of different MLV type-II vaccine strains. Herein we report a rapid and accurate technique aimed to discriminate between MLV type-I vaccine strains and Spanish field strains. This technique comprises a reverse transcription (RT) and nested polymerase chain reaction (nPCR) amplification of PRRSV ORF5 followed by a digestion of RT-nPCR products with two specific endonucleases, ItaI and AccI. Combined utilization of ItaI and AccI generates restriction fragments length polymorphisms (RFLP) patterns adequate for the differentiation of 30 Spanish field isolates, of which 12 were isolated between 1991 and 1995 and 18 between 2000 and 2003. These different RFLP patterns can be used to distinguish unequivocally between Spanish field strains of PRRSV and the three MLV type-I vaccines used in Spain: AmervacPRRS®, Pyrsvac-183® and PorcilisPRRS®.