Resumen de Colonial architecture and growth dynamics of Staphylococcus aureus resistant to methicillin
Fernando Gómez Aguado, María Luisa Gómez-Lus Centelles, María Teresa Corcuera Pindado, Luis Alou Cervera, M.J. Alonso Martín, David Sevillano Fernández, José Prieto Prieto, Daniel Val, Alejandra Palmeiro, Nuria Iglesias
- español
El objetivo del estudio fue observar la estructura colonial y la dinamica del crecimiento de Staphylococcus aureus resistente a meticilina (SARM) empleando cortes semifinos visualizados al microscopio optico. Se estudiaron una cepa de S. aureus sensible a meticilina (SASM) y un SARM.
Despues de cada periodo de incubacion (24 y 48 h) a 37oC las colonias fueron incluidas en una resina epoxi. Cortes semifinos de 0.5 um fueron tenidos con azul de toluidina y visualizados al microscopio. Desde el punto de vista microscopico, no se observaron diferencias estructurales entre las colonias de SASM y SARM. Si se observaron diferencias en ambas cepas entre las colonias de 24 y 48 h de incubacion.
En las colonias de 24 h se observaron 2 capas claramente diferenciadas: (A) una capa basal con alta densidad de poblacion en contacto con el medio de cultivo y (B) una capa superficial con menor densidad de poblacion.
En las colonias de 48 h se observaron cuatro capas: (A) una capa basal con alta densidad de poblacion; (B) una capa clara constituida por restos bacterianos muy degradados en cuyo seno se observan muy escasos y dispersos cocos que conservan sus propiedades tintoriales; (C) una capa mixta, constituida por una mezcla de bacterias vivas y restos bacterianos muy groseros y poco degradados y (D) una capa superficial con menor densidad de poblacion que la capa basal. Las colonias forman estructuras altamente organizadas originadas por la disponibilidad de nutrientes y mecanismos de comunicacion intercelular. La arquitectura colonial es un proceso complejo y tiempo dependiente.
- English
The aim of the study was to explore the structure and growth dynamics of Staphylococcus aureus resistant to methicillin (MRSA) colonies using semithin sections visualized by light microscope. One S. aureus susceptible to methicillin (MSSA) and one MRSA clinical strains were studied. Colonies in agar plates were embedded in epoxy resin after each incubation period (24 h and 48 h) at 37oC. Semithin sections of 0.5 um were stained with toluidine blue and visualized by light microscope. Microscopically, no structural differences were observed between SASM and SARM colonies but differences were observed in both strains between 24 and 48 h incubation periods. Colonies showed two layers clearly differentiated at 24 h independently of the resistance to methicillin: (A) one basal layer with high density of population in contact with culture media, and (B) one superficial layer with a lower density of population. Colonies showed four layers at 48 h: (A) one basal layer with high density of population; (B) one clear layer constituted by very degraded bacterial remains in which can be observed cocci dispersed with their dyeing properties; (C) one mixed layer constituted by viable bacteria and little degraded bacterial remains (D) one superficial layer with a lower density of population than basal layer. Colonial architecture is a complex and time-dependent process.
