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Cultivo in vitro de Anaplasma marginale en líneas celulares endoteliales

  • Autores: Sarahí G. Luna-Castro, Sergio Rodríguez Camarillo, Patricia Ramírez-Noguera, J. Francisco Preciado de la Torre, Edmundo E. Rojas-Ramírez, Juan J. Mosqueda-Gualito, Miguel A. García-Ortíz, Carlos A. Vega y Murguía
  • Localización: Revista Mexicana de Ciencias Pecuarias, ISSN 2007-1124, ISSN-e 2448-6698, Vol. 1, Nº. 4, 2010, págs. 373-390
  • Idioma: español
  • Títulos paralelos:
    • In vitro culture of Anaplasma marginale in endothelial cell lines
  • Enlaces
  • Resumen
    • español

      Anaplasma marginale, bacteria intracelular obligada, es el agente causal de la anaplasmosis bovina, caracterizada por anemia progresiva, fiebre, pérdida de peso y ocasionalmente, la muerte. Como alternativa para el desarrollo de nuevas estrategias de prevención se plantea el uso de cultivos celulares para la obtención in vitro de A. marginale. El propósito de este estudio fue ensayar su cultivo in vitro en células nucleadas empleando estirpes de células endoteliales de bovino y de mono, mismas que fueron expuestas a eritrocitos infectados con A. marginale. Para demostrar la invasión de las células endoteliales se emplearon diferentes opciones: tinciones, detección genómica o inmunofluorescencia, con resultados negativos; adicionalmente, tampoco se apreciaron efectos citopatológicos. Sin embargo, cuando se aplicó la metodología de co-cultivo en presencia de las células endoteliales, A. marginale se detectó durante más tiempo que en cultivos con eritrocitos únicamente. Con el supuesto de evidenciar la presencia de la infección, mediante la valoración de las constantes fisiológicas y anticuerpos específicos contra la bacteria, se inocularon bovinos susceptibles con el material biológico de los cultivos. Aún cuando no hubieron signos clínicos de anaplasmosis, en el bovino inoculado con la línea de córnea co-cultivada con eritrocitos infectados, se detectaron anticuerpos específicos contra A. marginale; sin embargo, no se logra dilucidar en este estudio la participación de las células endoteliales.

    • English

      Anaplasma marginale, intracellular bacteria causes bovine anaplasmosis, characterized by progressive anemia, fever, decrease in body weight and death occasionally. The use of A. marginale in vitro cell culture � derived has been suggested as an alternative for development new prevention tools and control strategies. The purpose of this study was to establish the in vitro culture procedure in bovine corneal or umbilical cord and monkey retina endothelial cell lines. These were subsequently exposed to A. marginale infected erythrocytes. Different staining methodologies, immunofluorescent antibody assays or genome detection tests were used in an attempt to demonstrate the invasion of nucleated cells. In all cases, only negative results were obtained and no cytopathic effects observed; when the co-cultivation methodology was applied, it was blunt the fact that if endothelial cells are present, A. marginale can be preserved longer periods than cultivating infected erythrocytes alone.

      Susceptible cattle were inoculated with culture-derived biological material, and samples taken to monitor physiological variables, rickettsemia and immune response against the bacteria. Animals did not show clinical signs of anaplasmosis. Even though a calf inoculated with the cornea cell line co-cultivated with infected erythrocytes, showed antibody against A. marginale;

      endothelial cell lines involvement in Anaplasma marginale infection could not be clearly demonstrated in this study.


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