Influence of Epidermal Growth Factor on mammalian oocyte maturation via tyrosin-kinase pathway

• Autores: Pedro Luis Lorenzo González, I.K.M. Liu, Juan Carlos Illera del Portal, R.A. Picazo, G.F. Carneiro, María Josefina Illera del Portal, A.J. Conley, A.C. Enders, Mariano Illera Martín
• Localización: Journal of physiology and biochemistry, ISSN-e 1877-8755, ISSN 1138-7548, Vol. 57, Nº. 1, 2001, págs. 15-22
• Idioma: inglés
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• Resumen
  • español

    El factor de crecimiento epidérmico (EGF) promueve diversas funciones en el ovario de mamífero, incluyendo la maduración de los oocitos. El objetivo del presente trabajo consiste en establecer que el EGF es un regulador de la maduración de los oocitos mediante un mecanismo en el que están implicadas enzimas tirosina-kinasas y la presencia del receptor de EGF en los folículos ováricos mediante técnicas imunocitoquímicas. Para el estudio, se seleccionan oocitos ovinos y equinos tras la aspiración de los contenidos foliculares y se cultivan para su maduración in vitro, en TCM 199 durante 22 (ovinos) o 36 horas (equinos), en presencia de EGF y/o de tirfostinas A-23 y A-47, dos inhibidores selectivos de la actividad tirosina-kinasa (TKIs). La maduración de los oocitos se expresa como porcentaje de los que alcanzan el estadío nuclear de metafase II. Los oocitos cultivados en presencia de EGF presentan mayor porcentaje de maduración que los controles. La presencia de TKIs en los medios con EGF da lugar a tasa de maduración similar a las de los controles). El receptor para el EGF se ha localizado en folículos ováricos, siendo su presencia más acusada en el cúmulo celular y en las células de la granulosa. En conjunto, los resultados obtenidos confirman que el EGF tiene un papel importante en la regulación fisiológica de la maduración del oocito mediante enzimas tirosina-kinasas.

  • English

    Epidermal growth factor (EGF) has been reported to promote different functions in mammalian ovaries, including oocyte maturation. The aim of the present study was to establish: that EGF influences oocyte maturation in ovine and equine, that a tyrosine kinase-dependent intracellular mechanism mediates EGF effect and, that EGF-R receptor is detectable in ovarian follicles by immunohistochemistry methods. Selected ovine and equine oocytes were aspirated from 2-5 mm (ovine) or 25 mm (equine) follicles and cultured in TCM 199 for 22 (ovine) or 36 hours (equine). They are then subjected to culture with EGF and two specific tyrosine-kinase inhibitors (TKIs, tyrphostins A-23 y A-47). Maturation was determined as the percentage of oocytes at metaphase II stage after culture. Treatments with EGF significantly increased incidences of metaphase II stage compared to controls (86.2% vs. 55% and 70.4% vs. 22.5% in ovine and equine oocytes, respectively). Tyrphostins A-23 and A-47 were effective in suppressing EGF-effect on oocytes. EGF-receptor was localized in follicles, being more prominent in cumulus and granulosa cells. These results confirm that EGF has a physiological role in the regulation of oocyte maturation via tyrosine-kinase pathway