Desarrollo y aplicación de maracadores microsatélites en olivo (olea europaea l.)

• Autores: Pilar Rallo Morillo
• Directores de la Tesis: Antonio Pedro Martin Muñoz (dir. tes.), Gabriel Dorado Pérez (codir. tes.)
• Lectura: En la Universidad de Córdoba (ESP) ( España ) en 2001
• Idioma: español
• Tribunal Calificador de la Tesis: Luis Miguel Martín Martín (presid.), Teresa Millán (secret.), Pere Arús Gorina (voc.), Diego Barranco Navero (voc.), Juan M. Caballero Reig (voc.)
• Materias:
  • Ciencias agrarias
    • Agronomía
      • Hibridación de cultivos
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• Resumen

  • En esta tesis se han desarrollado y optimizado por primera vez marcadores microsatélites (SSRs) de olivo (Olea europaea L.). Para ello se ha construido una genoteca parcial enriquecida para secuencias repetitivas (GA). De la secuenciación de 43 clones, se han obtenido 13 secuencias micosatélites, cinco de las cuales amplificaron productos polimórficos del tamaño seperado.

    Se han optimizado las condiciones de amplificaicón de los SSRs, se han comparado distintas matrices de electroforesis (agarosa,p liacrilamida desnaturalizante y no desnaturalizante) y se ha puesto a punto un sistema fluorescente de detección de productos de amplificación (ABI 310, Applied Biosystems).

    El polimorfismo de los microsatélites desarrollados se ha evaluado en una colección de 51 cultivares de olivo. La alta capacidad discriminatoria de los SSRs ha permitido identificar el 90% de las variedades analizadas, 15 de ellas mediante alelos únicos o combinaciones alélicas únicas en un solo locus.La transferibildiad de los SSrs de olivo se ha confirmado en 32 individuos de 15 especies del género Olea, en los que se detectó polimorfismo a nivel intra e interespecífico. Se ha evaluado la paternaidad de más de 300 individuos procedentes de cruzamientos entres distintas variedades de olivo.Los microsatéltites se han revelado como un instrumento muy eficaz en la detección de individuos procedentes de contaminaciones por polen extraño, e incluso han permitido identificar akl posible genitor paterno de una porgenie en la que se sospechaba de un error cometido durante el cruzamiento. Finalmente, se han intentado mapear 12 microsatélites (cuatro de los aquí desarrollados y ocho recientemente publicados) en la población "Leccino" x "Dolce Agogia". Al menos seis SSRs se añadieron a grupos de ligamiento de cada parental, establecidos en base a marcadores RAPD, AFLP y RFLP. Se han detectado tres grupos de ligamiento homólogos de "Leccino" y "Dolce Agogia