Desarrollo en macroalgas: sustancias reguladoras, fotofisiología y diferenciación celular (tetrasporogénesis) durante los estadios de crecimiento "in vitro" del alga roja Grateloupia doryphora
- Autores: Marta Rodrigo Sanz
- Directores de la Tesis: Rafael Robaina Romero (dir. tes.), Pilar García Jiménez (dir. tes.)
- Lectura: En la Universidad de Las Palmas de Gran Canaria ( España ) en 1998
- Idioma: español
- Tribunal Calificador de la Tesis: Angel Luque Escalona (presid.), Pedro Sosa Henríquez (secret.), Ricardo Sánchez Tamés (voc.), María Candelaria Gil Rodríguez (voc.), Ioannes Tsekos (voc.)
- Programa de doctorado: DESCONOCIDO
- Materias:
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- Tesis en acceso abierto en: acceda
- Resumen
Desarrollo es el término polivalente empleado para describir los cambios en la estructura y función de un organismo a lo largo de su génesis, crecimiento, maduración y senectud de forma individual (ontogenia) y en la sucesión de generaciones (filogenia). El talo de un alga roja como Grateloupia doryphora rara vez se forma directamente a partir de la espora, existiendo estadios intermedios en el desarrollo. Con este trabajo se pretende la caracterización de estos estadios de cultivo in vitro que siguen o acompañan la morfología con aspectos fisiológicos y/o genéticos, estructurales, de diferenciación celular o incluso de expresión génica diferencial. Para ello, y tomando como herramienta común los Estadios de crecimiento establecidos en cultivo en el laboratorio, planteamos los siguientes trabajos, que constituyen los distintos Capítulos de la Tesis Doctoral:
1. Control del crecimiento por auxinas, citoquininas, giberelinas y poliaminas en el Estadio 0.
Llevamos a cabo un estudio de los efectos de los reguladores de crecimiento y de las poliaminas combinados con el glicerol en el Estadio 0 de G. doryphora. El trabajo comprendía un seguimiento completo del material sometido a los diferentes tratamientos con técnicas histológicas e histoquímicas y de valoración de dos índices de desarrollo y morfogénesis respectivamente.
2. Diferencias fotosintéticas y tolerancia al estrés salino y de temperatura entre los Estadios I y III.
Para su realización fue necesario la puesta a punto de la técnica del HansatechMR, que nos permitió obtener las curvas P-I (Fotosíntesis-Irradiancia) a partir de las que medir y comparar la actividad fotosintética en ambos estadios de crecimiento antes y después de someterlos a los tratamientos estresantes de salinidad y temperatura.
3. Alteraciones morfológicas y fotofisiológicas en el Estadio III por el efecto del fotoperiodo.
Sabemos de la existencia de modificaciones ligadas al desarrollo entre los Estadios I y III, por lo que el fotoperiodo y su efecto podría interpretarse incluso como "modulador" del desarrollo y de la expresión génica resultante. Un componente que podría revelarnos los cambios a este nivel es la composición y estructura, genéticamente controlada, del ficobilisoma. Para ello fue necesario poner a punto las técnicas de aislamiento del ficobilisoma y de electroforesis que permitieran observar las diferencias en sus polipéptidos estructurales tras el crecimiento y desarrollo en los distintos fotoperiodos.
4. Inducción y seguimiento de la diferenciación celular durante la tetrasporogénesis en el Estadio I.
En un primer experimento con controles bajo el microscopio óptico, el tratamiento de fotoperiodo corto parecía inducir la tetrasporogénesis en G. doryphora.
Posteriormente mediante el diseño de experimentos basados en transferencias de los sporelings cultivados desde un fotoperiodo control (16:8) al fotoperiodo inductor (8:16), queríamos conocer el tiempo necesario en uno y otro fotoperiodo y el grado de desarrollo de la planta, necesario para la inducción de un mayor número de estructuras, así como, su seguimiento desde las primeras etapas de este proceso de tetrasporogénesis.
Los resultados obtenidos permiten concluir que los distintos Estadios establecidos en un principio empíricamente sobre la curva de crecimiento de G.
doryphora in vitro, presentan diferencias fisiológicas importante entre ellos. Así el Estadio 0 resulta competente en el uso de reguladores de crecimiento; el Estadio I presenta una fotofisiología y tolerancia a la salinidad y temperatura muy diferente que el Estadio III o adulto. La inducción de la tetrasporogénesis tiene lugar entre el Estadio I y II mediante el fotoperíodo, que a su vez provoca alteraciones en la expresión génica durante el desarrollo del I al III.
