Avances en la detección serológica de helmintosis olvidadas y emergentes. Aproximación genómica del ensamblaje de Gnathostoma spinigerum

• Autores: Belén González Bertolín
• Directores de la Tesis: Maria Jesus Perteguer Prieto (dir. tes.), Ana Hernández González (dir. tes.)
• Lectura: En la Universidad Complutense de Madrid ( España ) en 2024
• Idioma: español
• Número de páginas: 241
• Títulos paralelos:
  • Advances in the serological diagnosis of neglected and emerging helminthosis. De-novo assembly of Gnathostoma spinigerum genome
• Tribunal Calificador de la Tesis: Carmen Cuéllar del Hoyo (presid.), Ana Montoya Matute (secret.), Soledad Fenoy Rodríguez (voc.), Ada Nelly Martínez-Villalobos (voc.), José Miguel Rubio Muñoz (voc.)
• Programa de doctorado: Programa de Doctorado en Microbiología y Parasitología por la Universidad Complutense de Madrid
• Materias:
  • Ciencias médicas
    • Patología
      • Parasitología
• Enlaces
  • Tesis en acceso abierto en: Docta Complutense
• Resumen
  • español

    La presente Tesis Doctoral versa sobre cinco grupos de enfermedades producidas por helmintos con características clínicas y epidemiológicas diferentes, pero también una peculiaridad común: carencia de métodos diagnósticos óptimos para implementar medidas de control. La neurocisticercosis y la hidatidosis pertenecen al grupo de las enfermedades tropicales desatendidas. En ambos casos, la disponibilidad de vacunas facilita que su control pueda ser una realidad. Aunque existen proteínas recombinantes con probada capacidad diagnóstica, no se han desarrollado técnicas serológicas para la identificación de áreas de elevada endemicidad. En el caso de la loasis, su importancia no radica en su sintomatología, que suele ser leve, sino en las reacciones adversas graves que se desencadenan en individuos con una alta microfilaremia cuando son tratados con ivermectina. Este es uno de los mayores impedimentos para alcanzar el objetivo de eliminación de la oncocercosis, en áreas coendémicas. Casos diferentes son las parasitosis producidas por Gnathostoma spinigerum y Angiostrongylus cantonensis, agentes productores de meningitis eosinofílicas. Ambos parásitos, originarios y endémicos del Sudeste Asiático, están en proceso de expansión geográfica. En España, la mayor parte de los casos son importados, y probablemente infradiagnosticados, debido a la falta de técnicas diagnósticas. Además, cabe la posibilidad de que existan casos autóctonos, ya que la especie A. cantonensis ha sido identificada en diferentes hospedadores en nuestro país. Respecto a la especie G. spinigerum, aún no existe publicado su genoma de referencia; hecho que dificulta la búsqueda y validación de candidatos antigénicos para el diagnóstico.

    Los objetivos de la Tesis Doctoral han sido enfocados al desarrollo de técnicas serológicas para estas helmintosis; como métodos de multiplexado que permitan cribados epidemiológicos conjuntos e identificación de áreas de potencial endemicidad, especialmente de neurocisticercosis. El fin último ha sido aportar conocimiento aplicado desde el punto de vista del diagnóstico serológico de estas parasitosis y conocimiento básico en aquellas que no han sido tan estudiadas, como es el caso de G. spinigerum. La consecución de estos objetivos ha implicado el empleo de metodologías de trabajo con antígenos recombinantes, técnicas moleculares, el desarrollo y estandarización de herramientas de diagnóstico serológico, así como métodos de extracción e identificación genómica. También se han utilizado diferentes tecnologías de secuenciación y herramientas bioinformáticas.

    La tecnología de multiplexado, empleada para el diagnóstico de neurocisticercosis e hidatidosis de manera combinada, ha proporcionado una herramienta útil en el cribado epidemiológico en áreas susceptibles. Se han validado diferentes marcadores para análisis de seroprevalencia de loasis en zona endémica, descartando los que mostraban una reactividad insuficiente. La evaluación de los candidatos para el serodiagnóstico de meningitis eosinofílicas ha permitido seleccionar un antígeno recombinante con potenciales propiedades diagnósticas, abriendo la posibilidad al desarrollo de un futuro diagnóstico serológico en España. Se ha realizado la primera aproximación para la obtención del ensamblaje de novo del genoma de G.spinigerum, empleando una tecnología de secuenciación híbrida basada en lecturas cortas y largas, lo cual supone el punto de partida para la obtención de un genoma de referencia de calidad.

    La Tesis Doctoral supone un avance en el campo de las técnicas diagnósticas serológicas de helmintos. Si bien es cierto que los estudios realizados no están exentos de limitaciones, el trabajo aporta herramientas y permite iniciar nuevas vías de investigación de las helmintosis desatendidas e importadas estudiadas.

  • English

    The present thesis deals with the development of serological tools for five helminth diseases with very different clinical and epidemiological characteristics. However, all these diseases have a common peculiarity: the lack of optimal diagnostic methods to implement control and/or elimination measures. Neurocysticercosis and echinococcosis, both diseases cause high morbidity, are included in the Neglected Tropical Diseases group, and their control is detailed in the Sustainable Development Goals. Control of both diseases could be achieved with the available vaccines. Serological techniques applicable to high-throughput systems have not been developed to identify areas of high endemicity, in spite of the availability of recombinant proteins with proven diagnostic capacity...