Transfección "in vivo" del tracto reproductor femenino del ratón
- Autores: Miguel Relloso Cereceda
- Directores de la Tesis: Pedro Esponda Fernández (dir. tes.)
- Lectura: En la Universidad Autónoma de Madrid ( España ) en 1999
- Idioma: español
- Tribunal Calificador de la Tesis: Carmelo Bernabeu Quirante (secret.), Javier Regadera (voc.), Antonio Nieto (voc.), Jorge López Saez (voc.)
- Materias:
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- Resumen
El desarrollo de métodos para la introducción de genes exógenos en animales, ha permitido el estudio de la expresión de genes y las funciones de algunas proteínas. Pero en estos últimos años estas técnicas se han aplicado a células y órganos de forma local e "in vivo", esta tecnología permitirá corregir desordenes genéticos y el estudio de la fisiología de proteínas y promotores en los órganos de interés.
En este trabajo los órganos estudiados son los del tracto reproductor femenino. Para inducir estas modificaciones genéticas se inyectaron complejos ADN/liposomas por el oviducto, lo que produjo la transfección del oviducto y del útero. En el oviducto la expresión de los genes exógenos se localizó en el istmo y la juntura útero-tubal, por otro lado el útero la expresión se localizó en la zona basal de las glándulas uterinas.
La expresión de los genes marcadores (beta-galactosidasa y GFP) se estudió por diferentes mbetodos tanto histológicos (histoquímica, fluorescencia e inmunohistoquímica) como moleculares (Westhern-bolt, Southern-blot y PCR).
Pero la parte fundamental de este trabajo es que se estudió algunos parámetros que afectan a la transfección del útero y del oviducto de los ratones, como son: la duración de la expresión de los genes marcadores, la extensión de la transfección en el tracto reproductor femenino, la eficiencia de dos vectores de transfección y el efecto de los momentos hormonales sobre la transfección..
