Rescate de un ARN sintético en partículas infectivas obtenidas a partir de plásmidos recombinantes que codifican las 10 proteínas del virus de la gripe
- Autores: Ignacio Mena Piñeiro
- Directores de la Tesis: Agustín Portela Moreira (dir. tes.)
- Lectura: En la Universidad Autónoma de Madrid ( España ) en 1996
- Idioma: español
- Tribunal Calificador de la Tesis: Luis Carrasco (presid.), Mauricio García Mateu (secret.), Luis Enjuanes Sanchez (voc.), Rosario Armas Portela (voc.), Rafael Muñoz Fernández (voc.)
- Materias:
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- Resumen
Se describe la utilización del sistema de expresión transitoria descrito por Fuerst et al. (1986) p.N.A.S.
Usa 83, 8122, para la expresion de proteinas del virus de la gripe. Basicamente, las celulas son infectadas con un virus vacunal recombinante que expresa la arn polimerasa del fago t7 (vtf7-3) y a continuacion son transferidas con plasmidos que contienen la secuencia de la proteina a expresar bajo el control del promotor del fago t7.
La co-expresion de las proteinas virales pb1, pb2, pa y np permitio reconstituir una polimerasa funcional, in vivo, capaz de expresar un gen de referencia (cat) clonado, en polaridad negativa, entre los promotores de un segmento viral, en un arn sintetico (arn-cat).
La co-expresion de las 10 proteinas del virus de la gripe permitio la obtencion en el sobrenadante de las celulas transfectadas, de particulas recombinantes que se asemejan, en su tamaño y morfologia, y en su modo de infectar celulas, a las autenticas particulas del virus de la gripe. Por lo tanto este sistema podria servir en el futuro para estudiar los procesos de formacion de la particula viral y de entrada en la celula de virus de la gripe.
