MicroRNAs en el desarrollo temprano del ratón análisis de la falta de función Dicer en el linaje del trofoblasto
- Autores: Bárbara Pernaute Lomba
- Directores de la Tesis: Miguel Manzanares Fourcade (dir. tes.)
- Lectura: En la Universidad Autónoma de Madrid ( España ) en 2009
- Idioma: español
- Tribunal Calificador de la Tesis: Paola Bovolenta Nicolao (presid.), Marcos Malumbres (secret.), Marco Milán Kalbfleisch (voc.), Miguel Torres Sánchez (voc.), Diego Franco (voc.)
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- Tesis en acceso abierto en: Biblos-e Archivo
- Resumen
Los procesos que tienen lugar durante el desarrollo embrionario temprano son fundamentales para el correcto establecimiento del patrón de cualquier organismo. La aparición de un desarrollo completamente intrauterino en mamíferos conlleva la formación de una estructura extraembrionaria altamente especializada y necesaria no sólo para el soporte del embrión sino también para su correcta formación en las etapas tempranas: el trofoblasto, precursor de la placenta. Los eventos que tienen lugar durante el desarrollo de las estructuras embrionarias y extraembrionarias están finamente regulados a nivel transcripcional y post-transcripcional.
Entre los mecanismos de regulación post-trancripcional se encuentra la represión mediada por microRNAs (miRNAs), RNAs de pequeño tamaño que se unen de forma complementaria a mRNAs diana provocando su degradación o impidiendo su traducción, y que se encuentran implicados en multitud de procesos entre los que se incluye el desarrollo.
En este trabajo hemos abordado el estudio de la función de los miRNAs durante las primeras etapas del desarrollo embrionario de ratón, centrando nuestra atención sobre el linaje extraembrionario del trofoblasto. Para ello hemos analizado el trofoblasto de embriones mutantes completos para la proteína Dicer, esencial en la maduración de estos represores y cuya deleción implica la ausencia de miRNAs maduros. Asimismo, hemos derivado dos líneas de células madre de trofoblasto (células TS) condicionales para Dicer, que nos han permitido delecionar el gen en cultivo y analizar el fenotipo de este tipo celular durante los primeros momentos tras la retirada de los miRNAs.
El análisis del fenotipo de falta de función de Dicer en el trofoblasto embrionario y en células TS, en combinación con la obtención por primera vez de los perfiles de expresión de miRNAs en embriones en post-implantación y en células madre de trofoblasto, nos ha servido para describir una función de los miRNAs en el mantenimiento de la población de células TS in vivo e in vitro. La deleción de Dicer provoca una drástica bajada de la proliferación de las células TS posiblemente debida a la ausencia de miRNAs implicados en el control del ciclo celular mediante un mecanismo similar al ya descrito para células madre embrionarias (ES). Por otro lado y al contrario de lo que sucede en células ES, la deleción de Dicer provoca la diferenciación de las células TS en los distintos tipos celulares del linaje del trofoblasto, entre los que se encuentran las células gigantes del trofoblasto (TGCs). La diferenciación hacia TGCs implica la endo-reduplicación programada del DNA, un fenómeno que raramente se da en las células de mamíferos y que de acuerdo a nuestros resultados podría estar controlado al menos en parte por miRNAs cuya expresión es predominante en el linaje del trofoblasto.
Por último, los resultados obtenidos en relación al fenotipo de falta de función de Dicer en embriones en post-implantación muestran que si bien los miRNAs son de vital importancia para el correcto desarrollo embrionario temprano, la función individual de cada uno de ellos va encaminada a la modulación de la expresión génica, confiriendo un grado extra de solidez a redes regulatorias en las que intervienen otros mecanismos como la regulación transcripcional.
