Resumen de Secuencia y caracterización de la fosfoproteina P32, principal antígeno temprano del virus de la peste porcina

Fernando Prados Mondéjar

• En esta tesis se presenta la localización y secuencia del gen que codifica la fosfoproteina p32, que es la proteína temprana mas antigenica que induce el virus de la peste porcina africana (vppa). El gen, llamado c204l, esta formado por 204 codones codificantes, se encuentra en el fragmento de restricción ecoric' de la zona central del genoma del aislado ba71v, y el sentido de transcripcion es hacia el extremo izquierdo del genoma. El atg utilizado como iniciador de la proteína p32 es el tercero de los tres que se encuentran al comienzo de la orf c'204l. La proteína p32 esta formada por un polipeptido de 194 aminoacidos en el aislado ba71v. La sintesis de la proteina p32 se produce principalmente a tiempos tempranos de la infeccion, aunque en celulas vero se observa un aumento de sintesis a tiempos muy tardios. La proteína es estable durante al menos 6 h. La proteina p32 esta presente en preparaciones de virus extracelular altamente purificado. Se ha expresado la proteina p32 en e. Coli, y tambien en vectores eucarioticos derivados del vv y de bv, bajo el control de los promotores constitutivos p7.5 y de la poliedrina, respectivamente.

  La proteína p32 se fosforila en residuos de serina situados en los 115 primeros aa del polipeptido. La proteína quinasa presente en viriones purificados del vppa es, al menos, una de las implicadas en la fosforilacion de la proteina p32. La proteína expresada en el sistema del vv también se fosforila. La proteina p32 es citoplasmica, no estando asociada a microsomas, organulos celulares o factorias virales, sino soluble en el citosol. La proteína p32 presenta variabilidad entre distintos aislados del vppa, tanto a nivel de movilidad electroforetica como a nivel de secuencia. El gen c'204l de los aislados ba71, ba71v y spe51 presenta dos deleciones, de 6 y 15 pb, frente a la secuencia de kir69v. Durante el proceso de adaptación del aislado ba71 a creer en células vero, la delecion de un nucleotido e