Replicación y recombinación en orígenes de replicación en schizosaccharomyces pombe

• Autores: Mónica Segurado Carrascal
• Directores de la Tesis: Francisco Antequera Márquez (dir. tes.)
• Lectura: En la Universidad de Salamanca ( España ) en 2002
• Idioma: español
• Tribunal Calificador de la Tesis: Andrés Aguilera López (presid.), Andrés Avelino Bueno Núñez (secret.), José Ayté del Olmo (voc.), Pablo Hernández Valenzuela (voc.), Sergio Moreno Pérez (voc.)
• Materias:
  • Ciencias de la vida
    • Biología molecular
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• Resumen

  • La recombinación genética juega un importante papel en el reparación de daños en el DNA incudios durante la replicación. Se conocen diversas mutaciones que afectan a proteínas que intervienen en la replicación como DNA polimerasas, helicasas o ligasas que provocan un aumento de la recombinación mitótica. En sistemas procariotas se ha demostrado que la recombinación asegura que la replicación sea completa reparando horquillas colapsadas o incluso es necesaria para iniciar la replicación. En eucariotas estos procesos son menos conocidos, pero se piensa que la recombinación entre cromátidas hermanas es responsable de la reparación de lesiones producidas durante la replicación.

    Por medio de electroforesis bidimensional hemos estudiado la recombinación mitótica en Schizosaccharomyces pombe durante la fase de síntesis del DNA.

    Nuestros resultados indican que los intermediarios de recombinación aparecen únicamente en regiones que contienen origenes de replicación. Análisis de cultivos sincrónicos de varias regiones del genoma que funcionan como orígenes de replicación, revelan que la aparición de intermediarios de Holliday sigue la misma cinética que la activación del orígen.

    Hemos determinado la frecuencia de integración en diferentes puntos del genoma, de un plásmido linearizado que contiene el gen marcador ura+ y hemos encontrado que la frecuencia de recombinación homóloga está aumetnada de 15 a 20 veces en regiones próximas a orígenes de replicación, por lo que sugerimos que los orígenes de replicación en S.pombe podrían actuar como hotsports de recombinación.

    Además mutantes afectados en genes de reparación como rad22+, rhp54+, rhp51+ han mostrado un severo defecto tanto en replicación como en recombinación.

    Planteamos la posibilidad de que ambos procesos estén relacionados funcionalmente en S.pombe, pudiendo la recombinación ser necesaria en zonas de inicio de la replicación para repara