Modificacion funcional de beta-glicosidasas bacterianas

• Autores: Cristina Lopez Camacho Roncero
• Directores de la Tesis: Julio Polaina Molina (dir. tes.)
• Lectura: En la Universitat de València ( España ) en 1997
• Idioma: español
• Tribunal Calificador de la Tesis: Rosa Frutos Illan (presid.), Emilia Matallana Redondo (secret.), Antoni Romeu Figuerola (voc.), Juan Carbonell Gisbert (voc.), Juliana Sanz Aparicio (voc.)
• Materias:
  • Química
    • Bioquímica
      • Genética bioquímica
      • Biología molecular
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• Resumen

  • PARA MODIFICAR LAS PROPIEDADES DE BETA-GLICOSIDASAS BACTERIANAS RESPECTO A SU RESISTENCIA TERMICA Y SU ESPECIFICIDAD DE SUSTRATO, SE HAN UTILIZADO DOS PROCEDIMIENTOS: MUTAGENESIS ALEATORIA CON HIDROXILAMINA Y CONSTRUCCION DE ENZIMAS HIBRIDOS MEDIANTE FUSION DE GENES HOMOLOGOS. MEDIANTE MUTAGENESIS CON HIDROXILAMINA, SE HAN IDENTIFICADO DOS MUTACIONES DE EFECTO ADITIVO EN EL GEN BGLA DE BACILLUS POLYMYXA, QUE INCREMENTAN LA VIDA MEDIA DEL ENZIMA. LA PRIMERA SUPONE UN AUMENTO EN EL CONTENIDO DE AMIN ALFA-HELICE DE LA PROTEINA, Y LA SEGUNDA LA DISMINUCION EN EL CONTENIDO DE AMINOACIDOS CON AZUFRE, FACILMENTE OXIDABLES.

    INTERCAMBIANDO FRAGMENTOS HOMOLOGOS, SE CONSTRUYERON 24 HIBRIDOS ENTRE DISTINTOS GENES QUE CODIFICAN ENZIMAS DE LA FAMILIA 1 DE CARBOHIDRASAS. PRACTICAMENTE NINGUNO DE ELLOS DA LUGAR A LA SINTESIS DE UN ENZIMAFUNCIONAL. ESTO SE EXPLICA POR LA ESTRUCTURA TAN COMPACTA, EN UN UNICO DOMINIO, QUE PRESENTAN TODOS ESTOS ENZIMAS.