Resumen de Cellular processing bodies and the hepatitis C virus life cycle: characterization of their dynamic interplay
Los cuerpos de procesamiento (cuerpos-P) son gránulos discretos y dinámicos localizados en el citoplasma de las células eucariotas en condiciones normales de crecimiento. Contienen mRNAs reprimidos en la traducción junto con proteínas que participan en la degradación de los mRNAs y proteínas de la maquinaría de los miRNAs. Curiosamente, distintos componentes de los cuerpos-P afectan la replicación de los virus RNA de polaridad positiva [RNA(+)], cuyo genoma imita a los mRNAs celulares. Recientemente, nuestro grupo ha demostrado que los componentes de los cuerpos-P PatL1, DDX6 y el complejo LSm1-7, que actúan como activadores del decapping de los mRNAs celulares, son necesarios para la traducción y la replicación del virus de la hepatitis C (VHC). De hecho, los correspondientes homólogos de estas proteínas son usados por otros virus RNA(+) que infectan distintos reinos, como el virus del mosaico del bromo, que infecta plantas, o el fago Qß. Además, un genome wide screening en levadura ha determinado que la exonucleasa Xrn1, que también se encuentra en los cuerpos-P, puede afectar a la tasa de recombinación de un virus RNA(+) de plantas conocido como el virus del enanismo ramificado del tomate (TBSV) y, en consecuencia, a la evolución viral. Se desconoce si la existencia de mecanismos similares podrían influenciar a otros virus RNA(+). Así pues, al comienzo de este trabajo se sabía que los componentes de los cuerpos-P están íntimamente relacionados con los ciclos vitales de los virus RNA(+). No obstante, no estaba claro si los cuerpos-P como estructuras juegan un papel importante en la propagación viral.
A lo largo de esta tesis doctoral hemos explorado la relación del VHC con los cuerpos-P, demostrando que el VHC promueve cambios en la composición de los cuerpos-P mediante la alteración de la localización de aquellos componentes que son necesarios para la replicación viral. Estas alteraciones se han relacionado específicamente con la traducción y/o replicación del VHC, pudiéndose revertir después de inhibir la replicación del VHC con un inhibidor de la polimerasa viral. Además, hemos demostrado que los componentes de los cuerpos-P pero no los gránulos per se son necesarios para la replicación del VHC. Adicionalmente, hemos puesto a punto un sistema de detección de recombinación en cultivo celular basado en replicones del VHC que permite analizar sucesos de recombinación y caracterizar la posible participación de los componentes de los cuerpos -P en este mecanismo de evolución. Con este sistema se han establecido las primeras estimaciones en la frecuencia de recombinación del VHC, indicando que la recombinación en este virus no es muy común. Contrariamente a los resultados observados en TBSV, la reducción del nivel de expresión de Xrn1 no alteró la tasa de recombinación del VHC indicando que la utilización de la exonucleasa no es una característica general en la recombinación de los virus RNA(+). En conjunto, estos resultados incrementan nuestro conocimiento sobre aspectos básicos de la biología del VHC así como de la íntima relación que este virus establece con el huésped.
