Desarrollo de un modelo experimental in vitro con células de neuroblastoma humano sh-sy5y para la evaluación de la toxicidad.

• Autores: Juan Carlos Ríos Bustamante
• Directores de la Tesis: Guillermo Repetto (dir. tes.), Ana María Cameán Fernández (codir. tes.)
• Lectura: En la Universidad de Sevilla ( España ) en 2003
• Idioma: español
• Tribunal Calificador de la Tesis: Carmen María Vázquez Cueto (presid.), M. José González Muñoz (secret.), Manuel Repetto Jiménez (voc.), Pilar Sanz Nicolás (voc.), Eduardo de la Peña Torres (voc.)
• Enlaces
  • Tesis en acceso abierto en: Idus
• Resumen

  • En la actualidad existe un gran número de compuestos químicos en uso, lo que motiva una gran preocupación acerca de los efectos que esos compuestos pueden provocar en la salud humana. Estos fundamenta el gran interés de desarrollar métodos alternativos a los protocolos de evaluación de la toxicidad en animales, ya sea por refinamiento de los procedimientos in vivo, o iben por el diseño de nuevos ensayos in vitro. El objetivo del presente trabajo ha sido diseñar y desarrollar un modelo experimental in vitro con células de neurobastoma humano tanto con células diferenciadas como no diferenciadas, que empleando biomarcadores bioquímicos y morfológicos, permitiera valorar y profundizar en el conocimiento de los efectos tóxicos agudos de diversos compuestos, así como su posible protección. Se ha empleado la línea celular SH-SY5Y que deriva de un neuroblastoma humano y representa un buen modelo de neuronas humanas inmaduras capaces de diferenciación neuronal. Como biomarcadores se estudió en el contenido proteico, la liberación y actividad lactato deshidrogenasa, la captación de rojo neutro, la metabolización de MTS, la actividad acetilcolinesterasa y el estudio morfológico. Como conclusión, se ha desarrollado un modelo experimental con células de neuroblastoma humano SH-SY5Y que permite la exposición in vitro a diferentes compuestos químicos, para la evaluación de los efectos tóxicos agudos, realizando estudios de citotoxicidad, metabolismo, y marcadores neuronales y morfológicos.

    El tratamiento durante cinco días de las células SH-SY5Y con una mezcla de Insulina, Transferrina humana, Selenio, Putrescina y Progesterona, en ausencia de suero bovino, ha permitido obtener células más diferenciadas, semejantes a las neuronas adultas. En orden decreciente de toxicidad in vitro, la secuencia más frecuente para los compuestos ensayados ha sido:Rotenona, pentaclorotenol, tribromofenol, carbamacepina, metoclopramida y dis