In vivo strategies for the study of ubiquitination and ubiquitin-related diseases: application to Angelman syndrome
- Autores: Juan Manuel Ramirez Sanchez
- Directores de la Tesis: Ugo Mayor Martínez (dir. tes.)
- Lectura: En la Universidad del País Vasco - Euskal Herriko Unibertsitatea ( España ) en 2016
- Idioma: inglés
- Tribunal Calificador de la Tesis: Jose Antonio Rodríguez Pérez (presid.), Maria Rosa Barrio Olano (secret.), Catherine Lindon (voc.)
- Materias:
- Enlaces
- Tesis en acceso abierto en: ADDI
- Resumen
Ubikuitilazioa neuronen garapenerako eta funtzionamendurako ezinbesteko da. Neuronetan ubikuitina itsatsita daukaten proteinen identifikazioak asko lagunduko luke prozesu honek garunean dituen zereginak hobeto ulertzeko. Baina ubikuitinatuak dauden proteinak kopuru oso txikian aurkitu ohi direnez, haien identifikazioa lan zaila da.Ugo Mayor Doktorearen laborategiak ubikuitinak kontrolatzen dituen proteinak ikertzeko estrategia eraginkor bat garatu du. Hain zuzen ere, estrategia ubikuitina biotinarekin in vivo markatzean datza. Tesi honetan zehar, estrategia hori Drosophilaren foto-errezeptoreetara hedatu dugu, ubikuitinazio bidezidorrak neurona heldu baten markoan ikertzeko in vivo eredu bat hedatuz. Bestalde, metodologia horren bidez Drosophila Ube3aren lehendabiziko in vivo substratua aurkitu dugu. E3 ligasa hori gizakietan Angelman sindromearen arduraduna da. Gainera, GFP-erauzketa metodo bat garatu dugu proteina bakarra isolatu eta bere ubikuitinatutako frakzioaren ikerkuntza errazten duena. Protokolo horretaz baliatuz, Ube3aren beste lau substratu biokimikoki balioztatu ditugu neurona-antzeko zelula sistema batean. Tesi honetan garatutako bi metodologiak ubikuitinazioa ikertzeko dauden beste estrategiak osatzeko abantaila apartak eskaintzen dituzte. Protokolo bi hauek ubikuitinazioan arazoak dituzten gaixotasunak hobeto ulertzen lagunduko dute etorkizunean.
