Optimización de una metodología para el aislamiento y detección molecular de huevos de Toxocara canis en muestras de suelo

• Autores: Dary Luz Mendoza Meza, Humberto Maldonado Santana
• Localización: Revista de Ciencias Universidad del Valle, ISSN-e 2248-4000, ISSN 0121-1935, Vol. 19, Nº. 1, 2015
• Idioma: español
• Títulos paralelos:
  • Optimization a Methodology for the Isolation and the Molecular Detection of Toxocara Canis Eggs in Soil Samples
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    La toxocariasis es una zoonosis  común  en países  en desarrollo, como  Colombia. La ingesta accidental de huevos de Toxocara sp representa la principal  vía de transmisión al humano, por tanto, la vigilancia de la contaminación ambiental es una de las principales estrategias en la prevención de la toxocariasis. El objetivo fue optimizar una metodología para evaluar la contaminación del suelo por huevos de Toxocara canis. Las muestras de suelo se colectaron en un parque público en la ciudad de con MgSO4 (r=1,20),  ZnSO4 (r=1,18),  NaCl (r=1,18)  y solución  de Sheather  (r=1,27).  El ADN del parasito se extrajo y se identifico mediante amplificacion de del ITS-2-ADNr (PCR-ITS-2) del T. canis y posterior  secuenciación de nucleótidos. El análisis  ANOVA  indicó  diferencia estadísticamente significativa (p<0,05) entre las concentraciones de ADN obtenidos con las soluciones de floculacion utilizadas para aislar los huevos. El analisis de PCR-ITS-2 mostro resultado positivo para T.canis en 7 de 13 muestras examinadas (53,84%). En conclusión, se demuestra que el método propuestoes eficiente para la deteccion T. canis en muestras de campo.

  • English

    Toxocariasis is a common  zoonosis  in developing countries, such  as Colombia. Accidental ingestion  of Toxocara sp. eggs represents the principal  form of transmission in humans. Therefore, monitoring of environmental contamination is the better strategy for preventing the toxocariasis. The objective  was to optimize a methodology for assessing soil contamination caused by Toxocara canis eggs. The soil samples  were collected  from a public  park in the city of Barranquilla (Colombia). The Toxocara eggs were isolated by centrifugation/flocculation with MgSO4  (r = 1.20),  ZnSO4 (r= 1.18),  NaCl  (r= 1.18)  and Sheather  solution  (r= 1.27).  The parasite  DNA was extracted  and T. canis and subsequent nucleotide sequencing. ANOVA analysis indicates a statistically significant difference (p<0,05) between the DNA concentration obtained with the flocculation used to isolate eggs. The PCR-ITS-2 analysis  showed  positive  results for T. canis in 7 out of 13 samples examined (53.84 %). In conclusion, it is s   T. canis