Resumen de Expresión diferencial entre estadios de Trypanosoma cruzi I en el aislamiento de un paciente con cardiomiopatía chagásica crónica de zona endémica de Santander, Colombia

Martha Lucia Díaz, Rodrigo Torres, Clara Isabel González

• español

  Introducción. Trypanosoma cruzi es el agente causal de la enfermedad de Chagas. Durante la infección en los huéspedes mamíferos, se observan dos formas del parásito: tripomastigotes y amastigotes. Enel curso de la diferenciación del parásito cada estadio expresa un patrón de proteínas específicas de fase, las cuales son responsables de sus características morfológicas, bioquímicas y biológicas, que podrían estar determinando un papel importante en la capacidad infecciosa, virulencia y supervivencia del parásito.Objetivo. Analizar la expresión diferencial entre los estadios tripomastigote y amastigote de un aislamiento de T. cruzi I, utilizando la electroforesis en dos dimensiones y la identificación de lasproteínas diferencialmente expresadas mediante espectrometría de masas.Materiales y métodos. Se utilizó un clon del aislamiento MHOM/07/338 de T. cruzi I y, mediante electroforesis en dos dimensiones, se compararon los perfiles proteicos de los estadios tripomastigotey amastigote del parásito. Las imágenes se analizaron con el software PDQuest y las proteínas diferencialmente expresadas se identificaron por MALDI TOF o LC MS/MS.Resultados. Los geles bidimensionales mostraron un promedio de 325 manchas proteicas en cada estadio. En los análisis comparativos se detectaron 21 manchas "sobreexpresadas" en el estadiotripomastigote y 30, en el estadio amastigote. Se seleccionaron 16 proteínas para identificación por espectrometría de masas y se clasificaron en diferentes categorías funcionales.Conclusiones. Las proteínas exclusivas de T. cruzi relacionadas, principalmente, con metabolismo glucolítico y ensamble del citoesqueleto, fueron las que presentaron una mayor expresión diferencialentre los estadios tripomastigote y amastigote del parásito. Estas proteínas podrían ser utilizadas para el diseño de fármacos.

• English

  Introduction. Trypanosoma cruzi is the causative agent of Chagas disease. During infection in mammalian hosts two main forms of the parasite are observed: trypomastigotes and amastigotes. During differentiation each stage of the parasite expresses a specific proteins pattern of phase, which are responsible for their morphological, biochemical and biological properties that could play an important role in the infectivity, virulence and survival of the parasite.Objective. To realize an expression analysis differential between the stages tripomastigote and amastigote of isolated of T. cruzi I, using the electrophoresis in two dimensions and identification of proteins differential expressed by means of mass spectrometry.Materials and methods. A clone of the isolated MHOM/07/338 of T. cruzi I was used. The protein profiles of the stages of the parasite were obtained by electrophoresis in two dimensions, which were visualized in gels dyed with blue of Coomassie. The images were analyzed with software PDQuest and the proteins differential expressed were identified by MALDI TOF or LC MS/MS. Results. The bidimensional gels showed an average of 325 protein spots in each stage. The comparative analyses detected 21 spots over expressed in the stage tripomastigote and 30 in the stage amastigote. 16 proteins were selected for identification by mass spectrometry and classified in different functional categories.Conclusions. The findings show to differential expression between tripomastigotes and amastigotes of exclusive proteins of related T. cruzi, mainly with glucolític metabolism and cytoskeleton and therefore they would be target potentials for the drug design.