INTRODUCCIÓN
El almacenaje de los cereales es una de las etapas críticas del proceso productivo y se ha convertido en una práctica de elevado nivel técnico (Hagstrum y Athanassiou, 2019). El almacenamiento deficiente de granos constituye una fuente de alimento para los insectos que causan pérdidas superiores al 10% durante la producción y de 10 a 20 % en poscosecha (Trivedi et al., 2018).
El gorgojo del maíz (Sitophilus zeamais Motschulsky; Coleoptera: Curculionidae), es una de las plagas de mayor relevancia de los cereales almacenados a nivel mundial (Mossi et al., 2011). Es un insecto cosmopolita y que cuenta con reportes de resistencia a los insecticidas más utilizados en su control como organofosforados (Braga et al., 2011; Ugurlu y Konus et al., 2015), piretroides (Haddi et al., 2018; Araújo et al., 2011) y fosfuro de aluminio (Daglish et al., 2014; Agriafioti et al., 2019).
En la actualidad existen múltiples opciones para combatir las plagas de insectos asociadas a granos almacenados, siendo los fumigantes sintéticos los más utilizados. Sin embargo, estos compuestos son tóxicos para mamíferos e inducen el desarrollo de resistencia en las plagas, lo cual obliga a buscar nuevas alternativas que presenten resultados similares a los convencionales pero que a la vez estén libres de los peligros que estos acarrean (Campos et al., 2019). Recientemente, ha surgido un creciente interés en la investigación sobre el uso de derivados de plantas como alternativa a los insecticidas sintéticos. Diferentes tipos de formulaciones de plantas, como polvos, extractos y aceites esenciales, están siendo investigadas por su potencial efecto insecticida de contacto y fumigante e insectistático como repelente o anti alimentario (Kambouzia et al., 2009).
La mayoría de las plantas con actividad insecticida/insectistática se caracterizan por ser aromáticas y tener uso medicinal, industrial o culinario, debido a la presencia de compuestos químicos pertenecientes al metabolismo secundario de la planta y mayoritariamente del grupo de los terpenos (Isman, 2020). Algunos de estos compuestos han mostrado propiedades tóxicas contra insectos fitófagos, por lo que han sido considerados como potenciales bioplaguicidas. Uno de los metabolitos secundarios más destacado es 1,8-cineol o Eucaliptol, el cual ha registrado actividad tóxica contra varias especies de insectos de importancia médica y agrícola (Sukontason et al., 2004) y según Lee et al. (2001) es uno de los fumigantes naturales con mayor futuro.
Existen variadas referencias sobre el uso de polvos, extractos o aceites esenciales de diferentes especies del género Eucalyptus para el control de plagas de los cereales almacenados. Sin embargo, según Trivedi et al. (2018) la forma más sencilla es secar las hojas, molerlas y mezclarlas con los granos. En relación a la actividad insecticida del polvo de diferentes especies de Eucalyptus,Onuminya et al. (2018) con una concentración de 0,1g de polvo de Eucalyptus camaldulensis en 500 g de maíz, obtuvieron un 80% de mortalidad de S. zeamais;Emeka et al. (2020) también con polvo de E. camaldulensis a una concentración de 5,0% reportaron un 65% de S. zeamais muertos a las 96 h de exposición. A su vez, Sitoe et al. (2020) señalan que el polvo de Eucalyptus citriodora, solo y en mezcla con ceniza, reduce significativamente el daño del maíz producido por Sitophilus oryzae. Por último, Dufera et al. (2019) indican que el polvo de Eucalyptus globulus disminuye en un 50% el daño por insectos en maíz almacenado sin afectar la germinación de las semillas.
En Chile, actualmente existen cerca de 342.000 hectáreas de plantaciones de Eucalyptus, que se cosechan para madera pulpable con edades entre 10 y 12 años. Algunas especies, como E. globulus, tienen la característica de brotar vigorosamente, produciendo biomasa en cantidades considerables, que debe ser manejada con podas o raleos (Pérez et al., 2020), generándose abundante material vegetal, sin mayores costos asociados, para uso industrial (Carey et al., 2006). El presente trabajo tuvo como objetivo evaluar, en condiciones de laboratorio, la acción insecticida e insectistática del polvo de follaje de E. globulus y E. nitens, para el control de S. zeamais.
MATERIALES Y MÉTODOS
El estudio se realizó en el Laboratorio de Entomología de la Facultad de Agronomía de la Universidad de Concepción, Campus Chillán, Región de Ñuble, Chile.
Material vegetal
La colecta de hojas de ambas especies de Eucalyptus se realizó en un bosque de 22 años de edad ubicado en la Estación Experimental "El Nogal" (36e35v S; 72e4' O), de la Facultad de Agronomía de la Universidad de Concepción, Campus Chillán, Chile. La identificación de las especies la realizó la botánica de la Facultad de Agronomía, que además fue quien estableció los árboles en 1994. El criterio de colecta fue el de Vogel et al. (1997), que consiste en seleccionar hojas al azar, de los cuatro puntos cardinales y tanto de la periferia como del centro del árbol. Las hojas se secaron en una estufa de convección forzada (Memmert Gmbh, UNB 500, Schwabach, Germany) a 40 ± 2°C por 48 horas. Luego de deshidratado, el follaje se pulverizó con un molino eléctrico para granos de café (Moulinex, A5052HF, Aleçon, France) y posteriormente se tamizó con un tamiz de 18 mesch (Dual Manufacturing, Chicago, Illinois, USA), para homogeneizar su granulometría.
Insectos
Se utilizaron adultos de S. zeamais provenientes de colonias permanentes del Laboratorio de Entomología que se reproducen en condiciones controladas de 25 ± 2°C de temperatura, 60% de humedad relativa y oscuridad total, en una cámara bioclimática (Memmert Gmbh, IPS 749, Schwabach, Germany) y maíz (Zea mays L.) como sustrato alimenticio. Los insectos utilizados en los bioensayos no tenían más de siete días de edad, por lo que una semana antes de realizar los bioensayos se retiraron todos los insectos adultos de una colonia y se esperó la emergencia de la F1. En los bioensayos donde fue necesario determinar el sexo de los insectos se utilizó el criterio de Halstead (1963), quien señala que el macho posee un rostrum de menor longitud, pero mayor grosor y ornamentación que el de la hembra.
El maíz de las colonias y bioensayos se obtuvo de la Estación Experimental "El Nogal" de la Facultad de Agronomía de la Universidad de Concepción y correspondió al cultivar Dekalb DK440 (Anasac Chile S.A). El grano se lavó con agua potable para eliminar algún residuo de insecticida y luego se sometió a condiciones de -4,0 ± 1°C de temperatura durante 72 horas, con el objetivo de eliminar alguna posible infestación previa con insectos que pudieran interferir en los resultados de los bioensayos.
Actividad insecticida por contacto
El bioensayo se realizó con la metodología de Silva-Aguayo et al. (2005), que evalúa la mortalidad, emergencia de insectos adultos (F1) y pérdida de peso y germinación del maíz. En frascos de vidrio de 400 mL se depositaron 200 g de maíz, los cuales se mezclaron con el polvo de E. nitens o E. globulus en concentraciones de 0,25; 0,5; 1,0; 2,0; 4,0 u 8,0 % (p/p). A continuación, cada frasco se infestó con 10 parejas de insectos y se evaluó la mortalidad a las 24, 48, 72 horas y a los 7 y 15 días después de la infestación (DDI). El porcentaje de mortalidad se corrigió con la fórmula de Abbott (1925). Al finalizar la evaluación de los 15 DDI se retiraron los insectos y polvo restantes y los frascos se devolvieron a la cámara bioclimática por 40 días más (55 DDI). Completado este plazo se evaluó la F1 y la pérdida de peso del grano por diferencia entre el peso inicial (100 g) y final del maíz. Cabe destacar que para esta última variable, al inicio del bioensayo, se dejaron en la cámara bioclimática cinco frascos con 200 g de maíz libres de insectos y polvo de modo de registrar una posible ganancia o pérdida de peso del grano que se pudiera atribuir equivocadamente a los tratamientos o insectos. Luego de evaluada la pérdida de peso del grano, el maíz se sometió a una prueba de germinación para determinar si el polvo de follaje de E. globulus o E. nitens afectaba el poder germinativo de las semillas. En placas Petri de 9 cm de diámetro, acondicionadas en su base con papel filtro Advantec N°2 (Advantec MFS, Inc. Pleasanton, California, USA) humedecido con agua destilada, se pusieron a germinar, a temperatura ambiente (20 ± 5°C), 20 semillas por repetición seleccionadas de aquellas que aparentemente no presentaban daño y al cabo de una semana se calculó el porcentaje de germinación, considerando el testigo como 100%. Cada tratamiento tuvo diez repeticiones que se almacenaron en una cámara bioclimática en condiciones de 25 ± 2°C de temperatura, 60% de humedad relativa y oscuridad total.
Actividad insecticida por fumigación
En este bioensayo se utilizaron envases plásticos de 200 mL, en cuyo interior se encontraba un tubo de PVC de 2,5 cm de diámetro y 5,0 cm de alto (Silva-Aguayo et al., 2005). En el espacio comprendido entre la pared externa del tubo e interior del envase plástico se depositaron 20 g de maíz infestado con 20 insectos adultos sin diferenciación de sexo. A su vez, en el interior del tubo se ubicaron los tratamientos en concentraciones de 0,25; 0,5; 1,0; 2,0; 4,0 u 8,0 % (p/p) de polvo de la especie de Eucalyptus a evaluar. Los tubos se cubrieron con una tela de tul para evitar que los insectos entraran en contacto con el polvo, pero sin evitar que los compuestos volátiles se liberasen al medio. A los 5 DDI se evaluó la mortalidad, que se corrigió con la fórmula de Abbott (1925). Cada tratamiento tuvo 10 repeticiones y durante el bioensayo, los frascos se almacenaron en una cámara bioclimática en las mismas condiciones que el bioensayo anterior.
Repelencia y antixenosis
El efecto repelente se evaluó utilizando una arena de libre elección, consistente en cinco placas Petri plásticas de 5 cm de diámetro, distribuidas cuatro de ellas alrededor de una placa central, formando una "X" y conectadas con tubos plásticos de 10 cm de largo y 0,25 cm de diámetro (Procópio et al., 2003). En las cuatro placas periféricas, se depositaron 20 g de maíz, pero en solo dos de ellas, opuestas diagonalmente, se aplicaron los tratamientos de polvo de E. nitens o E. globulus en concentraciones de 0,25; 0,5; 1,0; 2,0; 4,0 u 8,0 % (p/p). En la placa central se liberaron 50 insectos adultos sin diferenciación de sexo y a las 24 horas se contabilizó el número de insectos por placa. Cada arena de selección constituyó una repetición y se montaron 10 de ellas y con los valores obtenidos se calculó el índice de repelencia de Mazzonetto y Vendramim (2003) complementado con la escala de Bustos et al. (2017).
La antixenosis (no preferencia) se evaluó con la metodología de Cruzat et al. (2009) que consiste en una arena de selección, formada por ocho placas Petri plásticas de 5 cm de diámetro distribuidas alrededor de una placa central y conectadas a esta por tubos plásticos de 10 cm de largo y 0,25 cm de diámetro. En las ocho placas periféricas se depositaron 20 g de maíz, con los respectivos tratamientos; 0; 0,125; 0,25; 0,5; 1,0; 2,0; 4,0 u 8,0 % (p/p) de polvo de Eucalyptus y en la placa central se liberaron 100 insectos adultos, sin diferenciación de sexo. A los 5 DDI se contabilizó el número de insectos por placa y cada arena de selección constituyó una repetición montándose 10 de ellas.
Efecto anti-alimentario
Se utilizó una modificación de la metodología de Napoleao et al. (2013), que consistió en elaborar discos con una mezcla de harina de trigo y polvo de E. nitens o E. globulus en las diferentes concentraciones a evaluar. Los discos se realizaron con una solución de 30 mL de agua destilada y 10 g de la mezcla de harina de trigo más el polvo de Eucalyptus en concentraciones de 0,25; 0,5; 1,0; 2,0; 4,0 u 8,0 % (p/p). A continuación, con una micropipeta, se depositó 2 mL de la solución en láminas de silicona para repostería, donde se dejaron secar por 48 horas a temperatura ambiente (20 ± 5°C). Posteriormente, los discos se ubicaron en placas Petri de 5 cm de diámetro, que se infestaron con cinco insectos adultos, sin diferenciación de sexo, que llevaban 24 horas sin alimentarse. Cada disco se pesó al comenzar el bioensayo y a los 10 DDI para cuantificar por diferencia de peso el consumo de los insectos. Además, por tratamiento se establecieron cinco placas Petri con los discos, pero sin insectos, para calcular una posible pérdida o ganancia de peso por humedad ambiental. Cada tratamiento tuvo 10 repeticiones y con los datos obtenidos se calculó el índice de disuasión de la alimentación de Isman et al. (1990), complementado con los criterios de Liu et al. (2007).
Diseño experimental y análisis estadístico
El diseño experimental fue completamente al azar, con un arreglo factorial de 2 x 6 (2 especies de Eucalyptus y 6 concentraciones de polvo) para los bioensayos de actividad insecticida por contacto y fumigación, actividad repelente y efecto antialimentario, y de 2 x 7 para el de antixenosis. Los datos obtenidos, luego de verificados los supuestos de normalidad y homocedasticidad con las pruebas de Shapiro-Wilks y Levene, se transformaron con la fórmula arcoseno (x/100)1/2 y se sometieron a un análisis de varianza (ANOVA) y a una prueba de comparación de medias de Tukey con una significancia del 5% (a = 0,05) con el software Statistical Analysis System (SAS).
RESULTADOS Y DISCUSIÓN
El análisis estadístico factorial mostró que las interacciones (especie de Eucalyptus x concentración) no fueron significativas para los resultados de los bioensayos de efecto insecticida por contacto (p=0,99), efecto insecticida por fumigación (p=0,96) y antixenosis (no preferencia) (p=0,81) (Tabla 1). Lo anterior indica que no existe relación entre la especie de Eucalyptus y la efectividad del tratamiento. Por tanto, se realizó un análisis de varianza independiente para cada especie de Eucalyptus.
Bioensayo de actividad insecticida por contacto
La mortalidad de S. zeamais, obtenida con el polvo de ambas especies de Eucalyptus, fue inferior a 30% (Tabla 2). La mayor toxicidad se registró a los 15 DDI en la concentración
de 8,0% con 28,8 y 27,5% de insectos muertos para E. globulus y E. nitens, respectivamente. Aunque esta concentración, en ambas especies, no presentó diferencias estadísticas con 2,0 y 4,0%, que no superaron el 20% de mortalidad. Esto último indica que la efectividad del polvo no aumenta significativamente al incrementar su concentración. En la evaluación a las 24, 48, 72 horas y 7 DDI la mortalidad fue inferior a 10%. Considerando el criterio propuesto por Salvadores et al. (2007) quienes clasifican como prometedores aquellos tratamientos con una mortalidad mayor al 40%, ninguna de las concentraciones evaluadas en este bioensayo cumple con este umbral. Silva et al. (2003) reportaron resultados similares para polvo de E. globulus, a una concentración de 2,0%, con 1,7% de mortalidad para S. zeamais. Igualmente, los resultados de la presente investigación coinciden con Bittner et al. (2008), quienes señalan que a pesar de que 1,8-cineol es el principal componente del aceite esencial de E. globulus, alcanzando hasta un 82,6% de su composición total, este compuesto no presenta toxicidad por contacto significativa. González-Guiñez et al. (2016) evaluaron el aceite esencial de estas mismas especies de Eucalyptus, obteniendo una toxicidad por contacto que no superó el 10% de mortalidad, confirmando la baja actividad insecticida de contacto de E. globulus y E. nitens. En cuanto a la emergencia de insectos adultos (F1), en la concentración más alta evaluada (8,0%), se obtuvo 19,1% (80,9% de inhibición) de progenie (F1) en E. globulus y 13,3% (86,7% de inhibición) en E. nitens (Tabla 2). Este tratamiento, en ambas especies, presentó diferencia significativa con las restantes concentraciones, lo que indica que el efecto inhibitorio del polvo en la F1 se incrementa significativamente al aumentar su concentración. Cabe destacar que con la concentración de 2,0%, tanto de E. globulus como E. nitens, a pesar de que S. zeamais mostró una mortalidad inferior a 30%, este tratamiento presentó una F1 menor a 50%, lo que se podría deberse a un efecto ovicida o larvicida del polvo. Lo anterior coincide con González-Guiñez et al. (2016) para el aceite esencial de E. globulus y E. nitens contra S. zeamais y con Slimane et al. (2014) para E. globulus contra Orgya trigotephras Boisduval (Lepidoptera, Lymantriidae), concluyendo estos últimos que esta especie posee efecto larvicida, debido a su elevada concentración de 1,8-cineol. Además, Salvadores et al. (2007) plantearon como referencia de efectividad una reducción del 50% de F1, respecto al testigo, por lo que los resultados de esta investigación permiten señalar que el polvo de Eucalyptus, en concentraciones iguales o superiores a 2,0%, afecta el ciclo reproductivo de S. zeamais. Según González et al. (2011), lo anterior podría deberse a una interferencia con la oviposición de la hembra o la eliminación directa de los huevos. Al respecto, estudios realizados por Izakmehri et al. (2013) con aceite esencial de Eucalyptus camaldulensis, determinaron que la longevidad, fecundidad y fertilidad de la hembra de Callosobruchus maculatus se ve afectada severamente por el aceite esencial, pero no así la proporción de sexos de la progenie. Igualmente, Gehlot y Singhvi (2006) y Singh (2011) reportan una reducción significativa de la oviposición de C. maculatus como efecto de un extracto de hojas de E. globulus. Izakmehri et al. (2013), en bioensayos con semillas impregnadas con aceite esencial y expuestas a hembras de C. maculatus, concluyeron que el aceite no impide ni afecta la tasa de oviposición. Además, estudios histológicos, realizados por Bindhu et al. (2017), señalan que, a pesar de que algunos extractos o aceites esenciales afectan significativamente el número de oviposturas por hembra, no se observan daños en las diferentes estructuras de los ovarios, por lo que la reducción de la F1 se podría atribuir a una muerte del huevo o menores posturas por falta de alimentación y no a un efecto esterilizante en la hembra.
La pérdida de peso del grano en todos los tratamientos con polvo de Eucalyptus fue significativamente menor respecto al testigo que se consideró como 100%. En la concentración de 8,0%, se obtuvo una pérdida de peso de 11,3% en E. globulus y 11,9% para E. nitens versus un 58,9% del testigo (Tabla 2). La concentración de 8,0% no presentó diferencias estadísticas con 4,0% en E. nitens, pero sí en E. globulus, lo que permite indicar que en esta última especie el efecto podría incrementarse significativamente al aumentar la concentración de polvo. Sin embargo, estos valores son menores a los de Silva et al. (2003), quienes con 2,0% de concentración de polvo de E. globulus obtuvieron un 5,5% de pérdida de peso, mientras que en la presente investigación con la misma concentración de polvo se obtuvo 26,8 y 29%, para E. globulus y E. nitens, respectivamente. La divergencia con los resultados de Silva et al. (2003) podría deberse a una diferencia en la concentración de los compuestos químicos presentes en el polvo, lo que provocaría un mayor efecto repelente o disuasivo de la alimentación, produciendo un menor consumo por parte de los insectos.
La germinación del maíz no se vio afectada significativamente por ninguno de los tratamientos con polvo de Eucalyptus, ya que todos lograron una germinación superior al 90% y no presentaron diferencias estadísticas entre ellos (Tabla 2). Este porcentaje de germinación permite calificar las semillas como aptas para su uso comercial, según los umbrales establecidos por el Servicio Agrícola y Ganadero (SAG) de Chile, que, en la resolución N° 379 de 1991, señala que la semilla corriente debe lograr como mínimo un 85% de germinación, y la semilla certificada un 90% (Cerda et al., 2000). De esta forma, se puede señalar que el polvo de E. globulus y E. nitens no es fitotóxico para las semillas y no interfiere con el proceso germinativo del grano, por lo que podría utilizarse tanto para proteger cereales destinados a alimentación como para semilla. Lo anterior es una ventaja para el polvo de Eucalyptus, debido a que en investigaciones con maíz tratado con polvo de otras especies vegetales como P. boldus (Silva et al., 2003; Pérez et al., 2007), C. zeylanicum y P. nigrum (Salvadores et al., 2007), se observaron porcentajes de germinación inferiores al 80%.
Actividad insecticida por fumigación
Ninguno de los tratamientos evaluados superó el 40% de mortalidad. La mayor toxicidad se obtuvo con la concentración de 8,0%, con 22,5 y 20% de mortalidad, con E. globulus y E. nitens, respectivamente (Tabla 3). Sin embargo, este tratamiento no presentó diferencia estadística con las concentraciones de 0,5; 1,0, 2,0 y 4,0%, indicando que un aumento de la concentración del polvo no implica necesariamente una mayor mortalidad. En el caso del aceite esencial de estas dos especies del género Eucalyptus,González-Guiñez et al. (2016) reportaron valores de mortalidad superiores al 70% en los tratamientos de 20, 25, 30, 35 |jL aceite esencial L-1aire con E. nitens y con 35 |jL aceite esencial L-1aire en E. globulus, lo que indicaría que el polvo posee una menor concentración de compuestos volátiles con efecto insecticida que el aceite esencial. Según Alzogaray et al. (2100), existe una correlación positiva entre la actividad fumigante y la concentración de 1,8-cineol y a-pineno. Igualmente, Sukontason et al. (2004) atribuyen el efecto fumigante de Eucalyptus, en general, a 1,8-cineol, quienes evaluaron este compuesto con un 98% de pureza contra mosca doméstica (Musca domestica: Diptera: Muscidae) y la mosca de las letrinas (Chrysomya megacephala; Diptera: Calliphoridae), obteniendo, en ambas especies, un alto efecto fumigante y repelente. Finalmente, Lee et al. (2001), también evaluaron 1,8-cineol puro contra S. oryzae, Tribolium castaneum y Rhyzopertha dominica, a una concentración de 20%, obteniendo un 95% de mortalidad, por lo que el 8,0% de polvo evaluado en el presente estudio se puede considerar como bajo, lo que explicaría la reducida mortalidad obtenida con este tratamiento.
Repelencia y antixenosis
El índice de repelencia en todos los tratamientos fue menor 1, lo cual, de acuerdo a Mazzonetto y Vendramim (2003), clasifica el polvo de ambas especies de Eucalyptus como repelente, destacándose que, incluso, con la concentración más baja (0,25%), tanto en E. globulus como E. nitens, se registró repelencia (Tabla 4); aunque, de acuerdo a la escala de intensidad de la repelencia de Bustos et al. (2017) el efecto de 0,25% se clasifica como repelencia débil. Sin embargo, a partir de la concentración de 0,5%, el polvo de E. nitens presenta una repelencia alta (0,5) a muy alta (1,0; 2,0 y 4,0%) mientras que en E. globulus 0,5 y 1,0% mostraron repelencia alta, y 2,0% repelencia muy alta. En el caso del aceite esencial de E. globulus y E. nitens,González-Guiñez et al. (2016) también obtuvieron repelencia alta y muy alta en todos los tratamientos evaluados, lo que indicaría que, aunque los compuestos fumigantes estén en menor concentración en el polvo, esta es suficiente para provocar un comportamiento disuasivo en el insecto. Los resultados obtenidos también coinciden con lo reportado para polvos de otras especies como Ch. ambrosioides (Silva-Aguayo et al., 2005), C. annuum var. grossum, Cuminum cyminum L. (Apiaceae) y Origanum vulgare L. (Lamiaceae) (Salvadores et al., 2007). Aunque, algo que diferencia al polvo de
Eucalyptus spp. con las especies anteriormente mencionadas, es su efectividad en bajas concentraciones, ya que mientras estas muestran repelencia con concentraciones superiores a 1,0%, el polvo de E. globulus y E. nitens iguala o supera dichos resultados, con las concentraciones de 0,25 y 0,5 %. Por tanto, esto permite calificar el polvo de ambas especies de Eucalyptus como una alternativa eficaz para la prevención de ataques de S. zeamais.
En el bioensayo de antixenosis los insectos infestaron las placas Petri tanto tratadas como testigo. Sin embargo, la preferencia fue significativamente menor en aquellas que contenían alguno de los tratamientos de polvo de Eucalyptus (Tabla 5). En la concentración de 0,125% (la más baja evaluada), la preferencia, respecto al total de insectos, fue de 12,5 y 13,5%, para E. globulus y E. nitens, mientras que el testigo mostró 45,9 y 53%, respectivamente. El menor porcentaje de insectos por placa se obtuvo con la concentración de 8,0% con 2,5 y 0,5% de preferencia por parte de S. zeamais para E. globulus y E. nitens. Aunque, en esta última no se observaron diferencias estadísticas entre las concentraciones evaluadas, pero sí con el testigo. En E. globulus la preferencia por todas las concentraciones fue significativamente menor que el testigo y, a su vez, las concentraciones de 0,125, 0,25 y 0,5% mostraron una preferencia estadísticamente mayor que 8,0%, lo que indica una relación inversa entre preferencia y concentración de polvo de E. globulus. Estos resultados son superiores a los obtenidos con otras especies como C. ambrosioides, que con 1,0 y 2,0% de concentración alcanzó 69,8 y 62,9% de preferencias, respectivamente (Silva-Aguayo et al., 2005), y a una especie de la familia Fabaceae, identificada con el código 49-1-XIV, que con 1,0% de concentración obtuvo 42% de preferencia por parte de S. zeamais (Gónzalez et al., 2009). El hecho de que el polvo de E. globulus y E. nitens requiera de una menor concentración para lograr una menor preferencia de S. zeamais, confirma los resultados obtenidos en el bioensayo de repelencia y califica el polvo de follaje de estos árboles como una eficaz estrategia preventiva contra el ataque de S. zeamais.
Efecto anti-alimentario
Los mayores índices de disuasión de la alimentación (IDA) se obtuvieron, en ambas especies de Eucalyptus, con la concentración de 8,0%, alcanzando 47,2% en E. globulus y 60,5% en E. nitens (Tabla 5). Los tratamientos con concentraciones de polvo iguales o inferiores a 1,0%, alcanzaron un IDA menor a 20%, lo que, según la escala de Liu et al. (2007), clasifica a dichos tratamientos como sin capacidad de disuasión alimentaria. Por otra parte, las concentraciones de 2,0, 4,0 y 8,0% de E. globulus, lograron un IDA superior a 20%, pero menor a 50%, lo que, según los autores mencionados anteriormente, indica un efecto anti-alimentario débil. Finalmente, en E. nitens la concentración de 8,0% mostró un IDA de 60,5%, que clasifica al tratamiento como con inhibición moderada. Estos resultados son similares a los obtenidos por otros autores con aceite esencial o extractos de diferentes especies de Eucalpyptus.Saedi (2014) evaluó el efecto antialimentario del aceite esencial de E. globulus y E. camaldulensis, obteniendo que C. maculatus consumió en menor cantidad la dieta mezclada con aceite de E. globulus que la control. Además, Hamzavi y Moharramipour (2017), determinaron que el aceite esencial de E. camaldulensis disminuyó la tasa de crecimiento y de consumo de dieta de Tribolium consufum. Por último, Ebadollahi (2011) determinaron que los volátiles del aceite
E. globulus disminuyen la tasa de alimentación de T. castaneum.
Finalmente, la presente investigación permite aseverar que el polvo de E. globulus y E. nitens posee una prometedora actividad insectistática, con potencial para prevenir de manera eficaz los ataques de S. zeamais en granos almacenados. Sin embargo, es necesaria una mayor investigación del polvo de estas especies de Eucalyptus, junto con la respectiva validación en condiciones de bodega.
CONCLUSIONES
Los resultados obtenidos en la presente investigación permiten concluir que el polvo de E. globulus y E. nitens no presenta toxicidad significativa por contacto ni fumigación contra S. zeamais. Sin embargo, posee actividad insectistática como repelente y anti-alimentario, además de reducir la emergencia de insectos adultos (F1) sin afectar la germinación de semillas de maíz.