Identificación de componentes inmunodominantes de un aislado de Trypanosoma cruzi por inmunoblot y su estandarización con fines diagnósticos

• Autores: Elia Torres Gutiérrez, Dalia Barrios Palacios, Adela Luisa Ruiz Hernández, Margarita Cabrera Bravo, Yolanda Guevara Gómez, Gloria Elena Rojas Wastavino, Paz Maria Salazar Schettino, Martha Irene Bucio Torres
• Localización: Gaceta médica de México, ISSN 0016-3813, Vol. 151, Nº. 1, 2015, págs. 6-13
• Idioma: español
• Títulos paralelos:
  • Identification of immunodominant components of an isolate of Trypanosoma cruzi by immunoblot and its standardization for diagnostic purposes
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• Resumen
  • español

    Introducción: La serología convencional se utiliza para la detección de la infección por T. cruzi, con una sensibilidad y especificidad variables, pues gran cantidad de muestras presentan resultados dudosos o discordantes; para su confirmación diagnóstica es necesario desarrollar pruebas complementarias, como el inmunoblot. Objetivo: Identificar las principales proteínas inmunogénicas de un aislado de T. cruzi y establecer el criterio de positividad para el sistema de inmunoblot. Material y métodos: Se realizó la extracción y caracterización antigénica, y se estandarizó el inmunoblot. Se utilizó un panel de 35 sueros reactivos y 30 no reactivos (NR) a T. cruzi. Se aplicaron tres metodologías estadísticas para determinar los criterios de positividad. Resultados: Los sueros positivos compartieron un patrón con pesos moleculares (PM) de entre 10 y 250 kDa. Doce componentes presentaron una frecuencia de reconocimiento superior al 50%, de los cuales los de 27, 32, 34 y 38 kDa mostraron frecuencias cercanas al 100%. Entre los criterios de positividad evaluados, los componentes de 27 y 32 kDa mostraron una sensibilidad y especificidad del 100%. Discusión: El inmunoblot es adecuado para la confirmación de la infección por T. cruzi, por lo que se propone como un criterio de positividad altamente específico, especialmente en los casos discordantes.

  • English

    Introduction: Conventional serology was used for the detection of Trypanosoma cruzi infection, with diverse sensitivity and specificity results. Due to the number of samples with doubtful results, it is necessary to develop additional confirmation tests such as the immunoblot. Objective: The aim of this study was identify major immunogenic proteins of T. cruzi isolate and establish criteria for immunoblot positivity with diagnostic purposes. Methods: Immunoblot initial standardization was performed, determining optimal concentrations of antigen, serum, and second antibody. Thirty-five positive and thirty negative sera were assayed to evaluate different criteria of positivity and determine which provides greater sensitivity and specificity. Results:

    Immunoblot of T. cruzi positive sera shared a rich pattern of components with molecular weights between 10-250 kDa. Twelve components had a recognition rate higher than 50%, of which the polypeptides of 27, 32, 34, and 38 kDa were close to 100%. Of the positivity criteria evaluated, the recognition of the components of 27 and 32 kDa provided sensitivity and specificity of 100%. Discussion: The Immunoblot is suitable for confirmation of infection by T. cruzi, so it is strongly recommended for confirmation and discrimination of discordant cases. (Gac Med Mex. 2015;151:6-13) Corresponding author: Martha Irene Bucio Torres, marbu@unam.mx