Diagnóstico rápido y efectivo de brucelosis bovina en sangre, mediante una reacción en cadena de la polimerasa doble

• Autores: Víctor Eustorgio Aguirre Arzola, Mónica Alvarado González, José Luis Ibave González, Marisela Leal Hernández, Efrén Díaz Aparicio, Guadalupe Virginia Nevárez Moorillón, Francisco Javier Solís Martínez, Sigifredo Arévalo Gallegos, Blanca Estela Rivera Chavira
• Localización: Técnica Pecuaria en México, ISSN 0040-1889, Vol. 46, Nº. 2, 2008, págs. 147-158
• Idioma: español
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  • La brucelosis es una de las enfermedades infecciosas mas importantes del ganado y representa una barrera para la importacion y exportacion de productos lacteos y carnicos. En Mexico, el diagnostico se realiza mediante las pruebas serologicas de tarjeta, rivanol y fijacion del complemento. Los metodos moleculares, como la reaccion en cadena de la polimerasa (PCR), son herramientas rapidas y especificas para el diagnostico de la enfermedad. En el presente trabajo se desarrollo el diagnostico de brucelosis por PCR doble, a partir de muestras de sangre, utilizando los genes omp2 y BSCP31. Para este estudio se utilizaron 53 muestras de sangre con titulos de rivanol de 1:400 y 60 muestras con resultados negativos a las pruebas serologicas.

    Las concentraciones optimas de iniciadores y cloruro de magnesio para lograr la amplificacion especifica de los dos fragmentos, fueron de 100 nM y 0.5 mM respectivamente. La sensibilidad analitica alcanzada para la PCR doble fue de 100 fg/�Êl de ADN, mientras que la concentracion optima de amplificacion fue de 1 ng/�Êl de ADN. La especificidad analitica obtenida fue del 100 %, mientras que la sensibilidad y la especificidad diagnostica fueron del 96.3 % y 100 % respectivamente. Los resultados de este estudio aportan evidencia para el uso rutinario de la PCR doble para el diagnostico de la brucelosis bovina directamente de muestras de sangre, ya que es un metodo altamente seguro, sensible y especifico