Ayuda
Ir al contenido

Dialnet


Resumen de Comparación de métodos de diagnóstico de Verticillium dahliae en olivo: aislamiento en medio de cultivo y PCR

J. I. Páez Sánchez, J. M. Vega, B. Morera, Francisco de Paula Montes Tubío

  • El aislamiento de Verticillium dahliae en medio de cultivo está muy asociado a la presencia de síntomas, siendo la primavera y principios de verano la mejor época para su aislamiento. Plantas de olivo asintomáticas pueden estar infectadas por el patógeno y por ello es necesario el desarrollo de métodos de diagnóstico adecuados para su detección en las mismas. El objetivo de este trabajo era poner a punto un método para la detección de V. dahliae que pudiera ser utilizado en el Plan experimental de certificación de plantas de olivo en Andalucía. En los últimos años se han descrito algunas parejas de iniciadores de PCR (Reacción en cadena de la polimerasa) utilizados para el diagnóstico o la caracterización de las distintas especies de Verticillium. El método seleccionado consiste en una "nested-PCR" que amplifica una región de 140 pb de ADNr mitocondrial solo en el caso de V. dahliae. Para comprobar la eficacia de este método se comparó con el de aislamiento en medio de cultivo y se observó su comportamiento en las distintas estaciones del año en muestras de olivos infectados naturalmente, con y sin síntomas. Se usó el método con ADN extraído de cultivos monospóricos y de material vegetal de varias plantas con síntomas de verticilosis, obteniéndose en todos los casos el fragmento de ADN esperado. Para comparar los dos métodos se analizaron 560 muestras de las cuales 441 eran asintomáticas, 74 tenían síntomas frescos y 45 síntomas antiguos y estaban muy secas. El método de PCR resultó claramente más eficaz en la detección del patógeno en muestras asintomáticas y en muestras sintomáticas muertas. En las muestras sintomáticas vivas la frecuencia de detección por PCR fue también mejor que por aislamiento en medio de cultivo. El número de positivos obtenidos por PCR, aunque era mayor que por cultivo, también sufría un descenso en los meses de invierno y verano, siendo por tanto la primavera y el otoño las fechas más adecuadas para la detección de este patógeno. El método de PCR resultó ser más sensible que el de aislamiento en medio de cultivo por lo que se propone su uso en el Plan experimental para la obtención y control de variedades certificadas de plantas de vivero de olivo en Andalucía.


Fundación Dialnet

Dialnet Plus

  • Más información sobre Dialnet Plus