Resumen de Efecto de la hiperfosfatemia sobre la mioglobina y la función mitocondrial en células de músculo esquelético
María Martos Elvira, Ariadna Moreno Piedra, Alberto Guerrero Méndez, Sergio García Villoria, Javier Sanz Zamora, Ana Asenjo Bueno, Alba Silvestre Vargas, Susana López Ongil, María Piedad Ruiz Torres, Gemma Olmos Centenera
Introducción: El envejecimiento es un proceso irreversible que se asocia con la aparición de enfermedades crónicas como la sarcopenia. En este trastorno se observa atrofia y reducción del tamaño de las fibras musculares esqueléticas. Las causas de esta enfermedad no se conocen completamente, pero se han propuesto diversos factores. En relación a esto, datos previos de nuestro grupo de investigación demuestran una relación directa entre la sarcopenia y la hiperfosfatemia, proceso relacionado también con el envejecimiento. Uno de los mecanismos más relevantes implicados en el desarrollo de la sarcopenia es la disfunción mitocondrial en la que se puede observar, entre otros, aumento de las especies reactivas de oxígeno y alteraciones de la cadena transportadora de electrones. En este contexto, la mioglobina tiene un papel crucial debido a su capacidad de unión al complejo CIV como donador de oxígeno, aumentando su actividad. Objetivo: Considerando lo anterior el objetivo de este trabajo es analizar el efecto de la hiperfosfatemia asociada el envejecimiento en el músculo esquelético sobre la expresión de la mioglobina y la función mitocondrial. Metodología: Para los estudios se utilizaron mioblastos de ratón (C2C12) diferenciados a miotubos maduros durante 168 horas añadiendo Horse serum 2% al medio de cultivo, en presencia o ausencia de un donador de fósforo exógeno (BGP, 10mM). Se analizó la expresión proteica de mioglobina tanto en extracto celular total como en extracto mitocondrial. Para estudiar la función mitocondrial se analizaron mediante microscopía confocal, el estado del potencial de membrana y la cantidad de especies reactivas de oxígeno (ROS) empleando las sondas TMRM y Mitosox, respectivamente. Para conocer el estado metabólico de la célula se midió la producción de ATP mediante un ensayo especifico; y se analizaron proteínas y genes relacionados con el metabolismo glucolítico (Transportador de glucosa 1, Lactato deshidrogenasa A y fosfoglicerato quinasa 1) mediante Western Blot y RT-PCR. Resultados: Los resultados muestran una disminución de la expresión de Mioglobina tanto en el extracto celular completo como en el mitocondrial. Además, se observó una disminución del potencial de membrana mitocondrial y un aumento de expresión de los ROS. En relación al metabolismo encontramos una disminución de la cantidad de ATP producida y un aumento de genes y proteínas del metabolismo glucolítico. Conclusión: En base a estos resultados, se concluye que la hiperfosfatemia asociada al envejecimiento parece desempeñar un papel crucial en la disfunción mitocondrial y la disminución de la expresión de Mioglobina, pudiendo condicionar el metabolismo en el músculo esquelético.
